Wyrażanie CCR10 jest wspólną cechą komórek wydzielających Ab z komórek nabłonka i błon śluzowych nabłonka IgA czesc 4

Komórki B centrum kiełkowania (GC) można zdefiniować jako duże CD38 + CD19 + CD20hi; komórki plazmatyczne (PC) definiuje się jako duże CD38hiCD19 + / yCD20a; a komórki B pamięci są zdefiniowane jako małe lub duże CD38a CD19 + CD20 +. W migdałkach i okrężnicy, ekspresja CD38 i CD20 określała populacje zarówno komórek GC, jak i PC w populacji blastycznej (Figura 2a). Komórki GC zarówno w migdałku, jak i okrężnicy były ujemne zarówno dla CCR9, jak i CCR10, zgodnie z ich nie migrującym charakterem. Co ciekawe, podczas gdy część migdałkowego PC eksprymowała CCR10 (i mniejszą frakcję eksprymowaną CCR9), komórki okrężnicy PC były właściwie wszystkim CCR10 +. Podobnie, 85 – 95% PC w żołądku, jelicie czczym i jelicie krętym wyrażało CCR10, podczas gdy mniejszy procent komórek jelita cienkiego i niektórych żołądka wyrażał CCR9 (Figura 2b). W dodatku, w hybrydowej tkance limfatycznej, około 40% komórek fenotypowych PC eksprymowało CCR10 (Figura 2b), ale żadne komórki pamięci B obecne w żadnej tkance (nawet migdałki lub wyrostek robaczkowy) nie wykazywały CCR10 (dane nie pokazane). Mniej niż 15% PC CCR10 + w obu tkankach limfoidalnych i nie limfatycznych wyraża CD19, co sugeruje, że większość tych komputerów jest ostatecznie zróżnicowana (Figura 2c). Zatem ekspresja CCR10 na PC w żołądku, jelicie cienkim i okrężnicy koreluje z ekspresją MEC w tych tkankach (21, 22), podczas gdy ekspresja CCR9 na PC jelita cienkiego koreluje z ograniczoną ekspresją TECK jelita cienkiego (14) . Figura 2CCR10 ulega ekspresji na limfocytach tkanki śluzówki z fenotypem PC. Limfocyty wyizolowane z przewodu żołądkowo-jelitowego lub migdałka barwiono na CD19, CD20 i CD38 w celu określenia różnych podzbiorów komórek B (bramkowanych na dużych limfocytach przez rozproszenie). (a) Zarówno okrężnica, jak i migdałek zawierały znaczące populacje zarówno komórek G o fenotypie GC (CD38 + CD19 + CD20hi), jak i PC (CD38hiCD19 + / yCD20a). Komórki GC nie wyrażały CCR10 ani CCR9 (<3% komórek GC we wszystkich badanych tkankach), podczas gdy ułamek PC w migdałkach (22%. 4%) i praktycznie we wszystkich komputerach w okrężnicy (92%. 4% ) wyrażono CCR10. (b) CCR10 był również wyrażany na ogromnej większości komórek w jelicie czczym (90%. 7%), jelicie krętym (92%. 5%) i żołądku (87%. 10%) oraz znacznej części komórek w jelicie czczym. dodatek (38%. 11%). CCR9 był obecny na PC w jelicie czczym (36%. 14%) i jelicie krętym (41%. 18%), gdzie TECK jest również wyrażany i na PC w żołądku (13%. 7%). (c) Komórki GC zarówno w migdałkach i okrężnicy wyrażały wysokie poziomy CD19 (> 95% dodatnie), podczas gdy fenotypowo zdefiniowane PC w obu tkankach w dużym stopniu obniżało poziom CD19 (<15% dodatnich). Dane z cytometrii przepływowej są reprezentatywne dla dwóch próbek: migdałka, trzy żołądka, trzy jelita czcze, trzy jelita krętego, trzy okrężnice i dwie próbki wyrostka robaczkowego o średniej. Pokazano SD. Procent komórek pozytywnych względem CCR10 lub CCR9 w oparciu o kwadrant obejmujący 5% komórek barwionych kontrolą izotypową w dot-blotach. IgA jest przeważającą immunoglobuliną wytwarzaną przez rezydentne pacjenci w badanych tkankach nabłonka błony śluzowej (3), więc wykorzystaliśmy immunohistochemię do zbadania ekspresji CCR10 przez śluzówkowe limfocyty B wyrażające IgA (Figura 3). W okrężnicy ekspresja CCR10 kolokalizowała się na komórkach z ekspresją IgA (Figura 3a). Podobną kolokalizację CCR10 z IgA obserwowano w innych zbadanych tkankach nabłonka śluzówki (Figura 3b). Niewielki odsetek (<5%) PC eksprymujących IgG jest również obecny w tkankach śluzówki (3), a CCR10 nie wydaje się kolokalizować z wieloma tymi komórkami za pomocą immunohistochemii, chociaż kilka komórek IgG + było słabo CCR10 + (Figura 3c), podobne profilu barwienia krążących plazmariów IgG (patrz Figura 5 poniżej). Komórki wydzielające IgG w zapalnej reumatoidalnej błonie maziowej nie wykazywały ekspresji CCR10 (dane nie pokazane), co sugeruje, że CCR10 może charakteryzować komórki wydzielające Ab związane z błoną śluzową. Podsumowując, te wyniki identyfikują błony śluzowe IgA jako dominujący (nie bazujący na skórze) podzbiór limfocytów eksprymujący CCR10. Figura 3CCR10 jest wyrażana przez komórki plazmatyczne z błoną śluzową IgA. Tkanki nabłonkowe znane jako miejsca lokalizacji komórek plazmatycznych IgA zostały zredukowane do CCR10 (czerwony) i IgA1 / 2 (zielony, w aib) lub IgG (zielony, panel c). (a) Wzór ekspresji IgA na limfocytach okrężnicy jest identyczny z CCR10. Ponieważ CCR10 jest eksprymowany na powierzchni, a IgA może znajdować się zarówno na powierzchni, jak i wewnątrzkomórkowo, połączony panel obejmuje obszary o żółtym zachodzeniu, jak również obszary zielone i czerwone. (b) Połączone obrazy barwników CCR10 i IgA z innych tkanek zawierających komórki plazmatyczne IgA wykazują, że CCR10 kolokalizuje z IgA we wszystkich badanych miejscach. Przekazywane pod wpływem światła wydzielanie IgA można zobaczyć w lumenach dwunastnicy, jelicie czczym i wyrostku robaczkowym [przypisy: najśmieszniejsze nazwiska w polsce, linka treningowa dla psa, turnusy rehabilitacyjne krynica zdrój ] [więcej w: masc ochronna z wit a, tormed lubliniec, laremid ulotka ]