Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II cd

S-Ag oczyszczono metodą Buczylko i Palczewskiego (27) z modyfikacjami opisanymi przez Puig i in. (28). Końcową elucję z kolumny z heparyną-agarozą przeprowadzono przez gradient od 10 mM HEPES i 15 mM NaCl, pH 7,0, do 10 mM HEPES i 400 mM NaCl, pH 7,0. Oczyszczone bS-Ag połączono w pulę w oparciu o OD 278 nm. Przygotowanie rekombinowanej ludzkiej S-Ag (hS-Ag) opisano wcześniej (29). Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II cd”

Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd

Dodano streptawidynę sprzężoną z HRP (DAKO Corp., Carpinteria, California, USA) i inkubowano przez 30 minut, a następnie szkiełka przemyto PBS / 0,05% Tween-20. Na końcu dodano substrat peroksydazy diaminobenzydynę (Vector Laboratories Inc., Burlingame, California, USA) i inkubowano przez 15 minut. Szkiełka zostały przepłukane i wybarwione kontrastowo hematoksyliną Mayera. Dodano roztwór montażowy i szkiełka nakrywkowe. Wyizolowane komórki zrębu-naczyniowego zaszczepiano w szkiełkach komorowych (Nalge Nunc International, Naperville, Illinois, USA) w stężeniu 5 x 105 na komorę w DMEM zawierającym 20% FCS (HyClone Laboratories, Logan, Utah, USA) i 20 ng / ml rekombinowanej myszy G-CSF (R & D Systems Inc., Minneapolis, Minnesota, USA) do hodowli całonocnej. Read more „Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd”

Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad

Nie jest jasne, czy te mechanizmy promocji nowotworu, które są istotne dla indukcji SCC, są istotne dla BCC, chociaż, jak wspomniano wcześniej, aktywność ODC zwiększa się w BCC (20, 26, 27). Komórkowa zawartość poliaminy jest ściśle regulowana przez różne mechanizmy, w tym transkrypcyjną, translacyjną i posttranslacyjną regulację enzymów odpowiedzialnych za syntezę poliaminy i katabolizm, jak również wysoce indukowalny system transportu poliaminy (18, 28). Wielofunkcyjne białko znane jako antybiotyk (AZ) wywiera posttranslacyjną kontrolę ODC (29, 30). Nadekspresja AZ w skórze transgenicznych myszy z elementami promotora keratyny 5 (K5) lub keratyny 6 (K6) prowadzi do zmniejszenia aktywności ODC i zawartości poliaminy po podaniu skórnym promotorów nowotworowych (31). W tym badaniu oceniliśmy ODC jako cel molekularny dla chemoprewencji BCC. Read more „Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad”

Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry

Zaburzenia gojenia rany są problemem terapeutycznym o dużym znaczeniu klinicznym. Myszy ob / ob pozbawione leptyny charakteryzują się znacznie opóźnionym gojeniem się ran, co zostało wyjaśnione przez łagodny fenotyp cukrzycowy tych zwierząt. Tutaj pokazujemy, że leptyna ogólnoustrojowo i miejscowo poprawia lepszą retinabularyzację ran u myszy ob / ob. Leptyna całkowicie odwróciła atroficzną morfologię migrującego języka nabłonka obserwowaną na brzegach rany zwierząt z deficytem leptyny w dobrze zorganizowany nabłonek hiperproliferacyjny. Ponadto miejscowo zwiększona leptyna przyspieszała normalne warunki gojenia się ran u myszy typu dzikiego. Read more „Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA

Ekspresja glioksalazy (Glo1) była wcześniej związana z lękiem u myszy; jednak jego rola w lęku jest kontrowersyjna, a podstawowy mechanizm jest nieznany. Tutaj pokazujemy, że GLO1 zwiększa lęk, obniżając poziomy metyloglioksalu (MG), agonisty receptora GABAA. Myszy z nadekspresją Glo1 na sztucznym chromosomie bakteryjnym Tg wykazywały zwiększone zachowanie lękowe i zmniejszały stężenia MG w mózgu. Leczenie niskimi dawkami MG zmniejszało zachowanie podobne do lęku, podczas gdy wyższe dawki powodowały depresję lokomotoryczną, ataksję i hipotermię, które są charakterystycznymi efektami aktywacji receptora GABAA. Zgodnie z tymi danymi, stwierdziliśmy, że fizjologiczne stężenia MG selektywnie aktywowały receptory GABAA w neuronach pierwotnych. Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad 8

Nasze dane jednoznacznie potwierdzają hipotezę, że zwiększona ekspresja Glo1 powoduje nasilone zachowania podobne do lęku i jest wzmocniona przez wykorzystanie tła izogenicznego. Niniejsze badanie może również dostarczyć mechanistycznego wglądu w proponowane przez GLO1 as powiązania z innymi chorobami OUN, takimi jak autyzm (48, 49), zaburzenia afektywne (50, 51), zaburzenie lękowe (52) i schizofrenia (53). Badania asocjacyjne całego genomu człowieka wykazały związek pomiędzy zespołem niespokojnych nóg (RLS) a haplotypem zawierającym GLO1 (54, 55). Nasze wyniki sugerują, że rola GLO1 w sygnalizacji GABAergicznej może leżeć u podstaw jej powiązania z RLS. Rzeczywiście, agoniści receptora GABAA są stosowani do leczenia RLS (56). Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad 8”

Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 7

Transportery ABC są bezpośrednio odpowiedzialni za fenotyp SP i postulowane w celu ochrony komórek macierzystych przed stresem oksydacyjnym i genotoksycznym, chociaż charakter konkretnych substratów może zależeć od konkretnej tkanki (19). Jest prawdopodobne, że te transportery mogą odgrywać podobną rolę również w kontekście komórek T. Może to być szczególnie prawdziwe przy ustawianiu komórek Trm w miejscach zaporowych, takich jak jelita, gdzie mogą być one potrzebne do aktywnego usuwania substratów w celu utrzymywania komórek Trm w jelitach w stanie spoczynku. Rzeczywiście, komórki Trm jelita od myszy z niedoborem transportera miały fenotyp zapalenia. Warto zauważyć, że zwiększony IFN-y wytwarzanie przez komórki T jelitowe u tych myszy było ograniczone tylko do komórek Trm, ale nie do komórek innych niż Trm, zgodnie z wpływem swoistego dla Trm niedoboru transportera. Read more „Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 7”

Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej ad 8

Stężenie białka oznaczano za pomocą testu wiązania barwnika Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories), stosując standard BSA. MMP-9 w ekstraktach białkowych skrawków skórnych zwierząt z iniekcją i supernatantów stymulowanych granulocytow obojętnochłonnych oznaczono metodą zymografii żelatynowej, jak opisano wcześniej (27, 67). Poziomy aktywnych MMP w ekstraktach białkowych skóry oznaczano ilościowo za pomocą zestawu do kolorymetrycznego oznaczania MMP zgodnie z instrukcjami producenta (BIOMOL). Pokrótce, próbki białka inkubowano z kolorymetrycznym substratem MMP Ac-PLG [2-merkapto-4-metylo] -LG-OC2H5 w buforze reakcyjnym (końcowe stężenie substratu, 100 .M) w 37 ° C. Aktywność MMP w ekstraktach białkowych mierzono zmianą OD przy 412 nm i wyrażano jako względną aktywność MMP (odczyt OD412nm / min / mg białka skóry myszy wstrzyknięto patogennym IgG minus odczyt OD412nm / min / mg białka skóry myszy wstrzykniętej normalna kontrola IgG). Read more „Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej ad 8”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 7

Ustaliliśmy, że większość obu tych odrębnych populacji zamieszkałych w mięśniu szkieletowym uzupełniano w czasie z komórek macierzystych szpiku kostnego (komórki SP szpiku kostnego). Co więcej, nasze dane sugerują, że komórki SP pochodzące z mięśni i inne niż SP wykazują różne losy komórek podczas regeneracji wywołanej uszkodzeniem, odpowiednio, tworzenia śródbłonka naczyniowego i mięśni gładkich. Odkrycia te są zgodne z naszymi poprzednimi badaniami w szpiku kostnym (4), co wskazuje, że populacje komórek macierzystych o aktywności krwiotwórczej (komórki SP) również mogą wytwarzać śródbłonek naczyniowy. Z obecnych badań wynika jasno, że istnieje druga odmienna i odtwarzalna izolacja populacji komórek progenitorowych (nie będących komórkami SP), które są rezydentne w obrębie mięśni szkieletowych, a które mają charakter mezenchymalny, a nie hematopoetyczny, i przyczyniają się do regeneracji mięśni gładkich naczyń, ale nie do śródbłonka. , komórki podczas neowaskularyzacji wywołanej uszkodzeniem. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 7”

Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 6

A-Tubulinę stosowano jako kontrolę obciążenia. Pokazano reprezentatywne bloty Western. (B i E) Procent uszkodzeń związanych z cytokinezą w kontrolnych i leczonych hepatocytach, obliczony przez analizę barwienia a-keteniny, a-tubuliny i Hoechst (patrz Figura 4F). Dla każdego warunku analizowano 100 telofaz. Wyniki są reprezentatywne dla 4 niezależnych kultur. Read more „Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 6”