Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4

Wyniki przedstawiono jako wskaźniki stymulacji, obliczone jako średnie cpm hodowlanych w trzech powtórzeniach z antygenem, podzielone przez średnią cpm hodowli w trzech powtórzeniach z pożywką,. SE. Element restrykcyjny zaangażowany w prezentację antygenu oceniano za pomocą testów blokowania przeciwciał przy użyciu oczyszczonych przeciwciał przeciwko DR (klon L243), DQ (klon Tü 39 lub Tü 169), IA (klon AF6-120.1) lub IE (klon 14-4-4S ) (BD Pharmingen). Przeciwciała dodano w stężeniu 10 .g / ml do dołków zawierających komórki w obecności lub pod nieobecność odpowiedniego stymulującego antygenu. Hodowle inkubowano przez 60 godzin i pulsowano 3H tymidyną (1,0 Ci / 10 ul / studzienkę) przez ostatnie 18 godzin. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4”

Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością czesc 4

Regulację dla trzech genów potwierdzono dalej analizą Northern blot, stosując niezależne próbki z tego samego eksperymentu). Wzrost krotności dla każdego genu pomiędzy różnymi modelami otyłości nie był bezpośrednio porównywalny. Myszy DIO badano oddzielnie od dwóch pozostałych modeli genetycznych. Używane tu myszy DIO miały 20 tygodni, żywiły się dietą wysokotłuszczową (60% kcal z tłuszczu) przez 16 tygodni, przy średniej masie ciała około 60 g. Każdy model otyłości porównano z odpowiednią kontrolą szczupłą. Read more „Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością czesc 4”

Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy cd

Całkowity komórkowy RNA wyizolowano ze skóry kontrolnej i BCC, jak opisano wcześniej. RT-PCR przeprowadzono przy użyciu zestawu Promega A-1260 (Promega Corp., Madison, Wisconsin, USA) zgodnie z protokołem dostawcy. Wykaz starterów stosowanych do oceny ekspresji genów szlaku SHH w skórze i wywołanych UVB guzach u myszy TchN Ptch1 + / A / ODC przedstawiono w Tabeli 1. Tabela Granice stosowane do oceny ekspresji genów szlaku SHH. Metody punktacji częstość występowania i różnorodność nowotworów, barwienie H & E, analiza immunohistochemiczna białek Gli1, Ptch, bioder, cykliny D1 i PCNA, przygotowanie lizatu tkankowego, analiza Western blot i pomiar aktywności ODC i poziomów poliamin były takie same jak opublikowane wcześniej (16, 20, 21, 27, 31, 32). Read more „Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy cd”

Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry ad

Rany myszy typu dzikiego (Balb / c) otrzymywały 5 .g leptyny w 20 .l PBS dwa razy dziennie (8 rano, 8 wieczorem). Myszy kontrolne traktowano samym PBS. Rany z. Zmieszane. myszy leczono miejscowo leptyną po lewej stronie pleców i samym PBS po prawej stronie grzbietów. Read more „Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry ad”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad

Pierwsze egzjony Dnahc8 i Btbd9 zostały usunięte przez wstawienie odpowiednio kasetek z ampicyliną (AMP) i kanamycyną (KAN). (B) Liczba kopii BAC została oszacowana przez qPCR na genomowym DNA (n = 8 WT i 3. 5 Tg na linię). P <10. 10, jednokierunkowa ANOVA. Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad”

Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach

Nadzór immunologiczny w tkankach jest zależny od długożyciowego podzbioru komórek T pamięci obecnych w tkance (komórki Trm). Przypuszczalny podzbiór długo żyjących komórek macierzystych opornych na tkankę charakteryzuje się zdolnością do usuwania barwników Hoechst i jest określany jako populacja boczna (SP). W niniejszym opisie scharakteryzowano podzbiór komórek T SP (komórki Tsp), które wykazują fenotyp spoczynkowy (G0) u ludzi i myszy. Ludzkie komórki Trm w jelicie i BM zostały wzbogacone w komórki Tsp, które przeważnie znajdowały się w fazie G0 cyklu komórkowego. Ponadto, u myszy histonowych 2B-GFP, znacznik 2B-GFP był zatrzymany w komórkach Tsp, co wskazuje na fenotyp wolno-cykliczny. Read more „Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach”

Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 8

Wewnątrzkomórkowe barwienie przeprowadzono stosując odczynniki BD zgodnie z protokołem producenta. Przeciwciała cytometrii przepływowej dla ludzi i myszy zakupiono z BD, eBioscience i BioLegend. Dane z cytometrii przepływowej uzyskano na BD LSRII z oprogramowaniem Diva i analizowano za pomocą oprogramowania FlowJo 9.7.7 (Treestar). Zastosowano następujące przeciwciała znakowane fluorescencyjnie: anty ludzkiego CD3 (klon UCHT1, BioLegend), anty ludzkiego CD4 (klon RPA-T4, BD Biosciences), anty ludzkiego CD8 (klon SK1, BD Biosciences), anty ludzkiego CD69 (klon FN50; eBiosciences ), anty ludzkie CD103 (klon B-Ly7, eBiosciences), anty ludzkie CD62L (klon DREG-56, eBiosciences), anty ludzkie CCR7 (klon G043 H7, BioLegend), anty ludzkie CD45RO (klon UCHL1, BD Biosciences), anty ludzkie IFN-. (klon B27, BD Biosciences), anty ludzkie CD45RA (klon HI 100, eBiosciences), anty-mysie CD4 (klon RM4.5, BD Biosciences), anty-mysie CD8 (klon 53-6,7, BD Biosciences), anty-mysie CD69 (klon HI.2F3; eBiosciences), anty-mysie CD103 (klon 2E7; eBiosciences), anty-mysie CD62L (klon MEL-14; eBiosciences), anty-mysie CD44 (klon IM7; eBiosciences), anty myszy Thy1.1 (klon OX-7; BD Biosciences), przeciw myszy CD45.2 (klon 104; eBiosciences), przeciw myszy CD45.1 (klon A20, eBiosciences), przeciw myszy IFN-y (klon XMG1.1, BD Biosciences) i mysie TCR V. Read more „Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 8”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń

Naczyniowi pierwotniacze byli wcześniej izolowani z krwi i szpiku kostnego; w niniejszym dokumencie definiujemy obecność, fenotyp, potencjał i pochodzenie przodków naczyniowych znajdujących się w dorosłym mięśniu szkieletowym. Dwie odrębne populacje komórek zostały jednocześnie wyizolowane z mięśnia tylnego kończyn: populację boczną (SP) wysoce oczyszczonych hematopoetycznych komórek macierzystych i komórek spoza SP, które nie odtwarzają krwi. Stwierdzono, że komórki mięśniowe SP pochodzą z komórek SP szpiku kostnego i uzupełniają je; jednak w obrębie mięśnia były one fenotypowo różne od komórek SP szpiku. Komórki spoza SP również pochodziły z komórek macierzystych szpiku i zawierały progenitory o fenotypie mezenchymalnym. Mięśnie SP i komórki spoza SP izolowano od myszy Rosa26 i bezpośrednio wstrzykiwano do uszkodzonego mięśnia genetycznie dopasowanych biorców. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 8

Tak więc żadna technika określania ilościowego do tej pory nie może dokładnie określić udziału komórek macierzystych w neowaskularyzacji wywołanej uszkodzeniem. Bez względu na całkowite poziomy wszczepienia, nasze dane pokazują, że wyraźne populacje komórek śródbłonka naczyń i mięśni gładkich mogą być oczyszczone z mięśni szkieletowych, co wskazuje, że dorosła tkanka niezakończona może okazać się klinicznie ważnym źródłem komórek do autologicznych terapii komórek naczyniowych i inżynierii tkankowej. Co więcej, ponieważ tkankowe komórki progenitorowe zawierające tkankę mogą być regenerowane z przeszczepionych komórek macierzystych szpiku kostnego, przeszczep allogenicznego lub autologicznego genetycznie zmienionego szpiku kostnego może okazać się użyteczną strategią leczenia lub uzupełniającą terapią wspólnych patologii naczyniowych wynikających z wadliwej zdolności regeneracyjnej, w tym wieńcowej. i niedokrwienie obwodowe. Optymalizacja takich strategii leczenia wymagałaby lepszego zrozumienia odkładania, przeżycia i uwalniania takich progenitorów naczyniowych z ich miejsca zamieszkania w tkankach, jak również dokładniejszego charakteryzowania profilu molekularnego wybranych populacji docelowych. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 8”

Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 7

Niedawno wykazano, że Akt bezpośrednio redukuje kinazę syntazy glikogenu 3 (GSK-3), a tym samym działa na cytoszkielet mikrotubuli podczas wczesnej mitozy (42). Nasze odkrycia potwierdzają koncepcję, która naszym zdaniem jest nowatorska, że szlak PI3K / Akt jest kluczowym aktorem w procesie cytokinezy, który, podobnie jak polaryzacja i migracja komórek, wymaga specyficznej regulacji sieci cytoszkieletu. Istotnie, hamowanie PI3K podczas progresji mitozy zapobiegło uszkodzeniu cytokinezy iw konsekwencji spowodowało podział komórek na diploidalne potomstwo. Dostarczamy dowody, że mTORC1 nie był zaangażowany w ten proces. Przeciwnie, bezpośrednie zahamowanie Akt prowadziło do tego samego fenotypu, co hamowanie PI3K i ukierunkowało komórkę do wykonania pełnej cytokinezy, charakteryzującej się reorganizacją cytoszkieletu aktyny i aktywną lokalizacją RhoA do płaszczyzny cięcia. Read more „Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 7”