Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4

Wyniki przedstawiono jako wskaźniki stymulacji, obliczone jako średnie cpm hodowlanych w trzech powtórzeniach z antygenem, podzielone przez średnią cpm hodowli w trzech powtórzeniach z pożywką,. SE. Element restrykcyjny zaangażowany w prezentację antygenu oceniano za pomocą testów blokowania przeciwciał przy użyciu oczyszczonych przeciwciał przeciwko DR (klon L243), DQ (klon Tü 39 lub Tü 169), IA (klon AF6-120.1) lub IE (klon 14-4-4S ) (BD Pharmingen). Przeciwciała dodano w stężeniu 10 .g / ml do dołków zawierających komórki w obecności lub pod nieobecność odpowiedniego stymulującego antygenu. Hodowle inkubowano przez 60 godzin i pulsowano 3H tymidyną (1,0 Ci / 10 ul / studzienkę) przez ostatnie 18 godzin. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4”

Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd

Dodano streptawidynę sprzężoną z HRP (DAKO Corp., Carpinteria, California, USA) i inkubowano przez 30 minut, a następnie szkiełka przemyto PBS / 0,05% Tween-20. Na końcu dodano substrat peroksydazy diaminobenzydynę (Vector Laboratories Inc., Burlingame, California, USA) i inkubowano przez 15 minut. Szkiełka zostały przepłukane i wybarwione kontrastowo hematoksyliną Mayera. Dodano roztwór montażowy i szkiełka nakrywkowe. Wyizolowane komórki zrębu-naczyniowego zaszczepiano w szkiełkach komorowych (Nalge Nunc International, Naperville, Illinois, USA) w stężeniu 5 x 105 na komorę w DMEM zawierającym 20% FCS (HyClone Laboratories, Logan, Utah, USA) i 20 ng / ml rekombinowanej myszy G-CSF (R & D Systems Inc., Minneapolis, Minnesota, USA) do hodowli całonocnej. Read more „Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd”

Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad

Nie jest jasne, czy te mechanizmy promocji nowotworu, które są istotne dla indukcji SCC, są istotne dla BCC, chociaż, jak wspomniano wcześniej, aktywność ODC zwiększa się w BCC (20, 26, 27). Komórkowa zawartość poliaminy jest ściśle regulowana przez różne mechanizmy, w tym transkrypcyjną, translacyjną i posttranslacyjną regulację enzymów odpowiedzialnych za syntezę poliaminy i katabolizm, jak również wysoce indukowalny system transportu poliaminy (18, 28). Wielofunkcyjne białko znane jako antybiotyk (AZ) wywiera posttranslacyjną kontrolę ODC (29, 30). Nadekspresja AZ w skórze transgenicznych myszy z elementami promotora keratyny 5 (K5) lub keratyny 6 (K6) prowadzi do zmniejszenia aktywności ODC i zawartości poliaminy po podaniu skórnym promotorów nowotworowych (31). W tym badaniu oceniliśmy ODC jako cel molekularny dla chemoprewencji BCC. Read more „Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad”

Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry ad

Rany myszy typu dzikiego (Balb / c) otrzymywały 5 .g leptyny w 20 .l PBS dwa razy dziennie (8 rano, 8 wieczorem). Myszy kontrolne traktowano samym PBS. Rany z. Zmieszane. myszy leczono miejscowo leptyną po lewej stronie pleców i samym PBS po prawej stronie grzbietów. Read more „Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry ad”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA

Ekspresja glioksalazy (Glo1) była wcześniej związana z lękiem u myszy; jednak jego rola w lęku jest kontrowersyjna, a podstawowy mechanizm jest nieznany. Tutaj pokazujemy, że GLO1 zwiększa lęk, obniżając poziomy metyloglioksalu (MG), agonisty receptora GABAA. Myszy z nadekspresją Glo1 na sztucznym chromosomie bakteryjnym Tg wykazywały zwiększone zachowanie lękowe i zmniejszały stężenia MG w mózgu. Leczenie niskimi dawkami MG zmniejszało zachowanie podobne do lęku, podczas gdy wyższe dawki powodowały depresję lokomotoryczną, ataksję i hipotermię, które są charakterystycznymi efektami aktywacji receptora GABAA. Zgodnie z tymi danymi, stwierdziliśmy, że fizjologiczne stężenia MG selektywnie aktywowały receptory GABAA w neuronach pierwotnych. Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad 8

Nasze dane jednoznacznie potwierdzają hipotezę, że zwiększona ekspresja Glo1 powoduje nasilone zachowania podobne do lęku i jest wzmocniona przez wykorzystanie tła izogenicznego. Niniejsze badanie może również dostarczyć mechanistycznego wglądu w proponowane przez GLO1 as powiązania z innymi chorobami OUN, takimi jak autyzm (48, 49), zaburzenia afektywne (50, 51), zaburzenie lękowe (52) i schizofrenia (53). Badania asocjacyjne całego genomu człowieka wykazały związek pomiędzy zespołem niespokojnych nóg (RLS) a haplotypem zawierającym GLO1 (54, 55). Nasze wyniki sugerują, że rola GLO1 w sygnalizacji GABAergicznej może leżeć u podstaw jej powiązania z RLS. Rzeczywiście, agoniści receptora GABAA są stosowani do leczenia RLS (56). Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad 8”

Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 8

Wewnątrzkomórkowe barwienie przeprowadzono stosując odczynniki BD zgodnie z protokołem producenta. Przeciwciała cytometrii przepływowej dla ludzi i myszy zakupiono z BD, eBioscience i BioLegend. Dane z cytometrii przepływowej uzyskano na BD LSRII z oprogramowaniem Diva i analizowano za pomocą oprogramowania FlowJo 9.7.7 (Treestar). Zastosowano następujące przeciwciała znakowane fluorescencyjnie: anty ludzkiego CD3 (klon UCHT1, BioLegend), anty ludzkiego CD4 (klon RPA-T4, BD Biosciences), anty ludzkiego CD8 (klon SK1, BD Biosciences), anty ludzkiego CD69 (klon FN50; eBiosciences ), anty ludzkie CD103 (klon B-Ly7, eBiosciences), anty ludzkie CD62L (klon DREG-56, eBiosciences), anty ludzkie CCR7 (klon G043 H7, BioLegend), anty ludzkie CD45RO (klon UCHL1, BD Biosciences), anty ludzkie IFN-. (klon B27, BD Biosciences), anty ludzkie CD45RA (klon HI 100, eBiosciences), anty-mysie CD4 (klon RM4.5, BD Biosciences), anty-mysie CD8 (klon 53-6,7, BD Biosciences), anty-mysie CD69 (klon HI.2F3; eBiosciences), anty-mysie CD103 (klon 2E7; eBiosciences), anty-mysie CD62L (klon MEL-14; eBiosciences), anty-mysie CD44 (klon IM7; eBiosciences), anty myszy Thy1.1 (klon OX-7; BD Biosciences), przeciw myszy CD45.2 (klon 104; eBiosciences), przeciw myszy CD45.1 (klon A20, eBiosciences), przeciw myszy IFN-y (klon XMG1.1, BD Biosciences) i mysie TCR V. Read more „Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach ad 8”

Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej ad 8

Stężenie białka oznaczano za pomocą testu wiązania barwnika Bio-Rad (Bio-Rad Laboratories), stosując standard BSA. MMP-9 w ekstraktach białkowych skrawków skórnych zwierząt z iniekcją i supernatantów stymulowanych granulocytow obojętnochłonnych oznaczono metodą zymografii żelatynowej, jak opisano wcześniej (27, 67). Poziomy aktywnych MMP w ekstraktach białkowych skóry oznaczano ilościowo za pomocą zestawu do kolorymetrycznego oznaczania MMP zgodnie z instrukcjami producenta (BIOMOL). Pokrótce, próbki białka inkubowano z kolorymetrycznym substratem MMP Ac-PLG [2-merkapto-4-metylo] -LG-OC2H5 w buforze reakcyjnym (końcowe stężenie substratu, 100 .M) w 37 ° C. Aktywność MMP w ekstraktach białkowych mierzono zmianą OD przy 412 nm i wyrażano jako względną aktywność MMP (odczyt OD412nm / min / mg białka skóry myszy wstrzyknięto patogennym IgG minus odczyt OD412nm / min / mg białka skóry myszy wstrzykniętej normalna kontrola IgG). Read more „Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej ad 8”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 7

Ustaliliśmy, że większość obu tych odrębnych populacji zamieszkałych w mięśniu szkieletowym uzupełniano w czasie z komórek macierzystych szpiku kostnego (komórki SP szpiku kostnego). Co więcej, nasze dane sugerują, że komórki SP pochodzące z mięśni i inne niż SP wykazują różne losy komórek podczas regeneracji wywołanej uszkodzeniem, odpowiednio, tworzenia śródbłonka naczyniowego i mięśni gładkich. Odkrycia te są zgodne z naszymi poprzednimi badaniami w szpiku kostnym (4), co wskazuje, że populacje komórek macierzystych o aktywności krwiotwórczej (komórki SP) również mogą wytwarzać śródbłonek naczyniowy. Z obecnych badań wynika jasno, że istnieje druga odmienna i odtwarzalna izolacja populacji komórek progenitorowych (nie będących komórkami SP), które są rezydentne w obrębie mięśni szkieletowych, a które mają charakter mezenchymalny, a nie hematopoetyczny, i przyczyniają się do regeneracji mięśni gładkich naczyń, ale nie do śródbłonka. , komórki podczas neowaskularyzacji wywołanej uszkodzeniem. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 7”

Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 7

Niedawno wykazano, że Akt bezpośrednio redukuje kinazę syntazy glikogenu 3 (GSK-3), a tym samym działa na cytoszkielet mikrotubuli podczas wczesnej mitozy (42). Nasze odkrycia potwierdzają koncepcję, która naszym zdaniem jest nowatorska, że szlak PI3K / Akt jest kluczowym aktorem w procesie cytokinezy, który, podobnie jak polaryzacja i migracja komórek, wymaga specyficznej regulacji sieci cytoszkieletu. Istotnie, hamowanie PI3K podczas progresji mitozy zapobiegło uszkodzeniu cytokinezy iw konsekwencji spowodowało podział komórek na diploidalne potomstwo. Dostarczamy dowody, że mTORC1 nie był zaangażowany w ten proces. Przeciwnie, bezpośrednie zahamowanie Akt prowadziło do tego samego fenotypu, co hamowanie PI3K i ukierunkowało komórkę do wykonania pełnej cytokinezy, charakteryzującej się reorganizacją cytoszkieletu aktyny i aktywną lokalizacją RhoA do płaszczyzny cięcia. Read more „Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 7”