Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 5

Bardzo ciężka choroba u myszy DR3 TG immunizowanych S-Ag. Zwróć uwagę na całkowite zniszczenie warstw komórek fotoreceptorów, w tym komórek fotoreceptorów (H & E, x 200). Figura 2 Wrażliwość myszy HLA TG na indukowaną IRBP EAU. Bary są średnią ocen chorobowych. Częstość występowania choroby (dodatnia wśród wszystkich myszy) znajduje się obok każdego paska. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 5”

Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością czesc 4

Regulację dla trzech genów potwierdzono dalej analizą Northern blot, stosując niezależne próbki z tego samego eksperymentu). Wzrost krotności dla każdego genu pomiędzy różnymi modelami otyłości nie był bezpośrednio porównywalny. Myszy DIO badano oddzielnie od dwóch pozostałych modeli genetycznych. Używane tu myszy DIO miały 20 tygodni, żywiły się dietą wysokotłuszczową (60% kcal z tłuszczu) przez 16 tygodni, przy średniej masie ciała około 60 g. Każdy model otyłości porównano z odpowiednią kontrolą szczupłą. Read more „Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością czesc 4”

Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy cd

Całkowity komórkowy RNA wyizolowano ze skóry kontrolnej i BCC, jak opisano wcześniej. RT-PCR przeprowadzono przy użyciu zestawu Promega A-1260 (Promega Corp., Madison, Wisconsin, USA) zgodnie z protokołem dostawcy. Wykaz starterów stosowanych do oceny ekspresji genów szlaku SHH w skórze i wywołanych UVB guzach u myszy TchN Ptch1 + / A / ODC przedstawiono w Tabeli 1. Tabela Granice stosowane do oceny ekspresji genów szlaku SHH. Metody punktacji częstość występowania i różnorodność nowotworów, barwienie H & E, analiza immunohistochemiczna białek Gli1, Ptch, bioder, cykliny D1 i PCNA, przygotowanie lizatu tkankowego, analiza Western blot i pomiar aktywności ODC i poziomów poliamin były takie same jak opublikowane wcześniej (16, 20, 21, 27, 31, 32). Read more „Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy cd”

Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry cd

Test ten określa liczbę żywotnych komórek w testach proliferacji, ponieważ całkowita ilość utworzonego formazanowego produktu końcowego jest wprost proporcjonalna do liczby żywych komórek w kulturze. Test przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej. Keratynocyty HaCaT (DMEM / 10% FCS) lub ludzkie pierwotne keratynocyty (KBM-2) hodowano do 70% konfluencji i uśmiercano przez 24-godzinne głodzenie w pozbawionym surowicy DMEM (dla HaCaT) lub pozbawionym EGF KBM-2 ( dla komórek pierwotnych). Następnie komórki stymulowano 100 ng / ml ludzkiej rekombinowanej leptyny lub 10 ng / ml EGF. Po 10, 15, 20 lub 30 minutach inkubacji komórki zebrano do przygotowania ekstraktów jądrowych (26). Read more „Leptyna wspomaga ponowną epitelializację rany i stanowi bezpośrednią funkcję leptyny w naprawie skóry cd”

Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad

Pierwsze egzjony Dnahc8 i Btbd9 zostały usunięte przez wstawienie odpowiednio kasetek z ampicyliną (AMP) i kanamycyną (KAN). (B) Liczba kopii BAC została oszacowana przez qPCR na genomowym DNA (n = 8 WT i 3. 5 Tg na linię). P <10. 10, jednokierunkowa ANOVA. Read more „Glioksalaza 1 zwiększa lęk poprzez redukcję agonisty metyloglioksalu receptora GABAA ad”

Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach

Nadzór immunologiczny w tkankach jest zależny od długożyciowego podzbioru komórek T pamięci obecnych w tkance (komórki Trm). Przypuszczalny podzbiór długo żyjących komórek macierzystych opornych na tkankę charakteryzuje się zdolnością do usuwania barwników Hoechst i jest określany jako populacja boczna (SP). W niniejszym opisie scharakteryzowano podzbiór komórek T SP (komórki Tsp), które wykazują fenotyp spoczynkowy (G0) u ludzi i myszy. Ludzkie komórki Trm w jelicie i BM zostały wzbogacone w komórki Tsp, które przeważnie znajdowały się w fazie G0 cyklu komórkowego. Ponadto, u myszy histonowych 2B-GFP, znacznik 2B-GFP był zatrzymany w komórkach Tsp, co wskazuje na fenotyp wolno-cykliczny. Read more „Transportery ABC i NR4A1 identyfikują spoczynkowy podzbiór komórek T pamięci rezydujących w tkankach”

Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej

Zewnątrzkomórkowa proteoliza za pomocą układu plazminogen / plazmin (Plg / plazmin) i MMP jest wymagana do uszkodzenia tkanek w chorobach autoimmunologicznych i zapalnych. Wykazujemy, że kaskada Plg synergizuje z MMP-9 / żelatyna-za B in vivo podczas rozdzielenia skórno-naskórkowego w doświadczalnym modelu pęcherzykowego pemfigoidu (BP), choroby autoimmunologicznej. BP indukowano u myszy przez przeciwciała przeciwko antygenowi hemidesmosomowemu BP180. Myszy z niedoborem MMP-9 były odporne na eksperymentalne BP, podczas gdy myszy z niedoborem Plg i zarówno tkankowym aktywatorem Plg (tPA), jak i aktywatorem urokinazy Plg (uPA) wykazywały opóźnione i mniej intensywne tworzenie pęcherzyków indukowane przez przeciwciała przeciwko BP180. Myszy z niedoborem Plg lokalnie rozpuszczono w Plg lub aktywnej postaci MMP-9 (actMMP-9), ale nie w proenzymatycznej postaci MMP-9 (proMMP-9), rozwiniętym BP. Read more „Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń

Naczyniowi pierwotniacze byli wcześniej izolowani z krwi i szpiku kostnego; w niniejszym dokumencie definiujemy obecność, fenotyp, potencjał i pochodzenie przodków naczyniowych znajdujących się w dorosłym mięśniu szkieletowym. Dwie odrębne populacje komórek zostały jednocześnie wyizolowane z mięśnia tylnego kończyn: populację boczną (SP) wysoce oczyszczonych hematopoetycznych komórek macierzystych i komórek spoza SP, które nie odtwarzają krwi. Stwierdzono, że komórki mięśniowe SP pochodzą z komórek SP szpiku kostnego i uzupełniają je; jednak w obrębie mięśnia były one fenotypowo różne od komórek SP szpiku. Komórki spoza SP również pochodziły z komórek macierzystych szpiku i zawierały progenitory o fenotypie mezenchymalnym. Mięśnie SP i komórki spoza SP izolowano od myszy Rosa26 i bezpośrednio wstrzykiwano do uszkodzonego mięśnia genetycznie dopasowanych biorców. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń”

Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 8

Tak więc żadna technika określania ilościowego do tej pory nie może dokładnie określić udziału komórek macierzystych w neowaskularyzacji wywołanej uszkodzeniem. Bez względu na całkowite poziomy wszczepienia, nasze dane pokazują, że wyraźne populacje komórek śródbłonka naczyń i mięśni gładkich mogą być oczyszczone z mięśni szkieletowych, co wskazuje, że dorosła tkanka niezakończona może okazać się klinicznie ważnym źródłem komórek do autologicznych terapii komórek naczyniowych i inżynierii tkankowej. Co więcej, ponieważ tkankowe komórki progenitorowe zawierające tkankę mogą być regenerowane z przeszczepionych komórek macierzystych szpiku kostnego, przeszczep allogenicznego lub autologicznego genetycznie zmienionego szpiku kostnego może okazać się użyteczną strategią leczenia lub uzupełniającą terapią wspólnych patologii naczyniowych wynikających z wadliwej zdolności regeneracyjnej, w tym wieńcowej. i niedokrwienie obwodowe. Optymalizacja takich strategii leczenia wymagałaby lepszego zrozumienia odkładania, przeżycia i uwalniania takich progenitorów naczyniowych z ich miejsca zamieszkania w tkankach, jak również dokładniejszego charakteryzowania profilu molekularnego wybranych populacji docelowych. Read more „Wyraźne populacje progenitorowe w mięśniach szkieletowych są pochodnymi szpiku kostnego i wykazują różne losy komórek podczas regeneracji naczyń ad 8”

Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 8

Całkowite RNA (Macherey-Nagel) wyizolowano z wątroby szczura i zastosowano jako matrycę do syntezy cDNA (synteza cDNA transkryptorowej pierwszej nici, Roche). Ilościową PCR w czasie rzeczywistym przeprowadzono przy użyciu urządzenia LightCycler (Roche Diagnostics) zgodnie z instrukcjami producenta i zestawem green kit SYBR (Roche). Jako startery zastosowano cyklofilinę (sensowny, 5a-ATGGCACTGGTGGCAAGTCC-3 (3, antysensowny, 5a-TTGCCATTCCTGGACCCAAA-3a), FAS (sensowny, 5a-ACCTGTCCCAGGTGTGTGAT-3y, antysensowny, 5a-GCTGTGGATGATGTTGATGA-3 (3), GK (sensowny, 5 (3-CACATCGTAGGACTTCTCCG-3 (3, antysensowny, 5 (3-GGCGGTCTTCATAGTAGCAG-3a), L-PK (sensowny, 5a-GTTGTTTGAGGAGCTACGCC-3 (3 antysensowny, 5 (3-GTCTTCGTCAGCACGATGAT-3.) I SREBP -1c (sensowny, 5 (3 -TTGAAGACATGCTTCAGCTC-3 (3, antysensowny, 5a-GCCTGTGTCTCCTGTCTCA-3a). Wartości podane dla każdego mRNA skorygowano do wartości mRNA cyklofiliny. Western blot. Read more „Droga insuliny / Akt kontroluje specyficzny program podziału komórek, który prowadzi do tworzenia dwujądrowych tetraploidalnych komórek wątroby u gryzoni. ad 8”