Synergia między kaskadą plazminogenu a MMP-9 w chorobie autoimmunologicznej ad

Testy chromogenne Plasmin wykazały znacznie podwyższoną aktywność plazminy w skórze zmian skórnych, podczas gdy Plg. /. i tuPA. /. myszy wykazywały jedynie poziomy tła aktywności plazmin w skórce niejonowej. Zgodnie z oczekiwaniami (23, 25), infiltrujące neutrofile były obecne w górnej skórze właściwej w miejscu uszkodzenia / perylacji i w jamie blistrowej, jak pokazano histologicznie (Figura 1B, wkładka). Rysunek System Plg / plazmin jest wymagany do eksperymentalnego BP. Myszom WT i myszom z niedoborem różnych składników układu Plg / plazmin wstrzyknięto id chorobotwórczą anty-mBP180 IgG (R530) lub kontrolną IgG i badano 12 godzin później. (A. H) WT (A i B), tPA. /. (E) i uPA. /. (F), ale nie tuPA. /. (G) lub Plg. /. (H) myszy, którym wstrzyknięto patogenne IgG, opracowano pęcherze podnaskórkowe. WT wstrzyknięte kontrolnej IgG nie wykazywało choroby (C i D). Strzałki wskazują miejsca podstawowych keratynocytów. E, naskórek; D, skóra właściwa; V, pęcherzyk pęcherzykowy. Powiększenie, × 200. Wyższe powiększenia sekcji wybarwienia H & E pokazują infiltrujące neutrofile w skórze właściwej (wypustki). Groty strzałek wskazują neutrofile. Powiększenie, × 920. (I) Test chromogenny Plasmin wykazał znacząco wyższe poziomy aktywności plazmin w uszkodzonej skórze WT (t. 1), tPA. /. (t. 3) i UPA. /. (pasek 4) myszy w porównaniu z niejonową skórą kontrolną (t. 2), tuPA. /. (t. 5) i Plg. /. (pasek 6) myszy. Przedstawione dane są średnie. SEM. n = 9 dla każdej grupy; * P <0,001 względem WT. (J) Badanie aktywności MPO po 12 godzinach po wstrzyknięciu (czarne słupki) wykazały znacznie wyższe poziomy rekrutacji PMN w skórze zmianowej WT (t. 7), tPA. /. (t. 9) i UPA. /. (bar 10) myszy w porównaniu z tuPA. /. (t. 11) i Plg. /. (t. 12) myszy. W 4 godziny po iniekcji (szare słupki) wszystkie myszy miały podobną liczbę naciekających neutrofili. n = 9 dla każdej grupy; * P <0,001 względem WT. Tabela Związek między układem Plg / plazmin i MMP-9 w doświadczalnym BP Po 4 godzinach od iniekcji IgG wszystkie myszy miały podobną liczbę naciekających neutrofili w skórze, oznaczonych ilościowo za pomocą testu mieloperoksydazy (MPO), co wskazuje, że brak aktywności plazminy nie zakłócał wczesnych etapów migracji neutrofili z krążenia do miejsca zapalnego tkanki (Figura 1J). Jednakże, 12 godzin po wstrzyknięciu, naciek neutrofilów był znacząco wyższy u chorych myszy (WT, tPA p / p, i uPA p / p) niż w Plgp / p. i tuPA. /. nietknięte myszy (n = 9 dla każdej grupy, Figura 1J). Wyniki te pokazują, że system Plg / plazmin bezpośrednio przyczynia się do tworzenia pęcherzyków podnaskórkowych w doświadczalnym BP. Plasmin działa przed MMP-9. Nasze poprzednie dane pokazują, że MMP-9 jest wymagany do tworzenia pęcherzyków podnaskórkowych (27). Ponieważ plazmina jest również bezpośrednio zaangażowana w rozwój choroby, następnie oceniliśmy związek pomiędzy MMP-9 i plazminą w doświadczalnym BP przez wstrzyknięcie Plg. /. i MMP-9. /. myszy z patogenną IgG anty-mBP180, następnie godzinę później odtwarzano lokalnie za pomocą Plg, proenzymatycznej postaci MMP-9 (proMMP-9) lub aktywnej postaci MMP-9 (actMMP-9) (n = 9 dla każdej grupy ). Plg. /. myszy odtworzone za pomocą Plg lub actMMP-9, ale nie proMMP-9, rozwinęły zmiany BP o 12 godzin po wstrzyknięciu IgG (Figura 2, A (D)). MMP-9. /. myszy odtworzone przy użyciu actMMP-9 lub proMMP-9, ale nie Plg, również opracowały bąble podnaskórkowe (Figura 2, E (H)). Te wyniki pokazują, że actMMP-9 może zrekompensować niedobór Plg w rozwoju BP, podczas gdy Plg nie może zrekompensować niedoboru MMP-9. Wnioskujemy, że plazmin działa przed MMP-9. Rysunek 2 Generacja Plasmin znajduje się przed aktywacją MMP-9. (A. D) odtwarzanie rekonstrukcji MMP-9 przywraca BP w Plg. /. myszy. (A) Patogenne IgG anty-mBP180 (R530, iniekcja id, 2,64 mg / g masy ciała) wywoływały pęcherze podnaskórkowe w noworodkowym Plg. /. myszy odtworzono myszką Plg (5 .g / g masy ciała) (B) i actMMP-9 (2,5 .g / g masy ciała) (D), ale nie proMMP-9 (2,5 .g / g masy ciała) (C) i kontrola PBS (A). (E H H) Odtwarzanie Plg nie przywróciło BP w MMP-9. /. myszy. Patogenne IgG anty-mBP180 (wstrzyknięcie id, 2,64 mg / g masy ciała) wywołało pęcherze podnaskórkowe u noworodków MMP-9. /. myszy odtworzono taką samą ilością proMMP-9 (G) i actMMP-9 (H), ale nie kontrolnej myszy Plg (F) lub PBS (E). Powiększenie, × 200. (I) Jak myszy + / +, MMP-3. /. u myszy rozwinęły się obszerne blistry kliniczne i histologiczne (Tabela 1) i zgodne poziomy aktywności MMP w 12, 24, 48 i 72-godzinnych punktach czasowych, jak określono za pomocą testu kolorymetrycznego MMP (średnia . SEM). Ponieważ plazmina może aktywować MMP-3, a MMP-3 może aktywować proMMP-9 in vitro (30. 33), wówczas staraliśmy się ustalić, czy MMP-3 aktywuje bezpośrednio MMP-9 [podobne: najśmieszniejsze nazwiska w polsce, sennik koleżanka z pracy, refluks u dziecka objawy ] [przypisy: isonasin, trosicam 15 mg, najsmieszniejsze nazwiska ]