Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością czesc 4

Regulację dla trzech genów potwierdzono dalej analizą Northern blot, stosując niezależne próbki z tego samego eksperymentu). Wzrost krotności dla każdego genu pomiędzy różnymi modelami otyłości nie był bezpośrednio porównywalny. Myszy DIO badano oddzielnie od dwóch pozostałych modeli genetycznych. Używane tu myszy DIO miały 20 tygodni, żywiły się dietą wysokotłuszczową (60% kcal z tłuszczu) przez 16 tygodni, przy średniej masie ciała około 60 g. Każdy model otyłości porównano z odpowiednią kontrolą szczupłą. Absolutne poziomy ekspresji genów będących przedmiotem zainteresowania były niższe w szczupłej grupie kontrolnej modelu DIO niż w kontrolach typu dzikiego w modelach genetycznych z powodu różnicy w diecie (10% dieta niskotłuszczowa dla poprzedniej vs. 16% regularna karma dla tego ostatniego). Doprowadziło to do przesadnej zmiany złożenia dla modelu DIO. Z wyłączeniem czynnika dietetycznego i odmian eksperymentalnych, było jednak nadal oczywiste, że różne geny były różnie regulowane w górę wśród modeli otyłych, nawet gdy poziomy ekspresji były znormalizowane, jak pokazano na Figurze 1b. Na przykład ADAM8 był najbardziej radykalnie zwiększony u myszy DIO karmionych dietą wysokotłuszczową o zawartości 60%. W skrócie, podwyższenie poziomu genów zapalenia obserwuje się w WAT modeli mysich genetycznych i DIO, chociaż poziomy ekspresji dla każdego genu wydają się być regulowane inaczej w zależności od modelu. Zarówno dieta, jak i brak szlaków sygnalizacji leptyny mogły odgrywać tu rolę. Zgodnie z tą możliwością, regulacja genów zapalenia była mniej dramatyczna u myszy DIO karmionych dietą o zawartości tłuszczu 45% (Tabela uzupełniająca 1, http://www.jci.org/cgi/content/full/112/12/1821/DC1 ). Brak leptyny u genetycznie otyłych myszy może być nawet ochronny, ponieważ zgłaszano, że leptyna zwiększa syntezę estrów cholesterolu w hodowanych makrofagach (25). Figura (a) Transkrypcyjna regulacja genów zapalenia w WAT myszy z genetyczną lub dietetyczną otyłością / cukrzycą za pomocą ilościowego RT-PCR (TaqMan). Dla porównania poziom ekspresji tych genów u myszy szczupłych ustalono arbitralnie na 1; słupki błędu reprezentują. SE. LF, niska zawartość tłuszczu (10% tłuszczu); HF, o wysokiej zawartości tłuszczu (60% tłuszczu). myszy ob / ob i db / db oraz odpowiednie kontrole (n = 5 na grupę) uzyskano z The Jackson Laboratory, karmiono standardową karmą dla dzieci (wymiana rolników) i uśmiercano w 15 tygodniu życia. Myszy DIO (C57BL / 6J, The Jackson Laboratory) uzyskano w wieku 4 tygodni i umieszczono na wyznaczonej diecie o 60% kcal z tłuszczu (Research Diets Inc.) na 16 tygodni (n = 10 na grupę). y osie pokazują arbitralne jednostki reprezentujące względne poziomy ekspresji mRNA. (b) Potwierdzenie regulacji stanu zapalnego z genem za pomocą analizy Northern blot. Wykorzystano niezależny zestaw zwierząt z tego samego eksperymentu. Aby ustalić, czy wzrost ekspresji genów występuje przed rozwojem systematycznej insulinooporności, która charakteryzuje się hiperinsulinemią, śledziliśmy poziomy ekspresji tych genów w WAT myszy z otyłością indukowaną dietą wysokotłuszczową w wielu punktach czasowych dla 26 tygodnie. Masa ciała stale wzrastała w tym okresie, podobnie jak poziom glukozy na czczo, chociaż ta ostatnia pozostała w normalnym zakresie (<120 mg / dl) do pewnego czasu po 16 tygodniach (Figura 2a). Tymczasem zaobserwowaliśmy wzrost ekspresji niektórych z tych genów zapalenia już w 3 tygodnie na diecie wysokotłuszczowej (Figura 2b). Około 16 tygodni stosowania diety wysokotłuszczowej nastąpiło o wiele bardziej radykalne zwiększenie ilości transkryptów, co ściśle korelowało z wyraźnym wzrostem poziomów insuliny we krwi na czczo (ryc. 2). Wydaje się, że reakcja zapalna tkanki tłuszczowej wzrasta wraz ze wzrostem otyłości, przed wzrostem poziomu insuliny na czczo, ale nasila się na początku hiperinsulinemii. Figura 2. Regulacja transkrypcji genów zapalenia u myszy stopniowo otyłych i opornych na insulinę. Czas jest pokazany jako tygodnie na diecie. (a) Zmiany masy ciała, stężenia glukozy na czczo oraz insuliny w surowicy na czczo w ciągu 26 tygodni w przypadku diety. * Różnica statystycznie istotna (P <0,05, test ucznia). (b) ekspresja mRNA ADAM8, MIP-1 Dla porównania poziom ekspresji tych genów u myszy szczupłych ustalono arbitralnie na 1; słupki błędu reprezentują. SE. Myszy C57BL / 6J uzyskano z The Jackson Laboratory i rozpoczęto stosowanie diety zawierającej 10% tłuszczu (o niskiej zawartości tłuszczu, LF) lub 60% tłuszczu (o wysokiej zawartości tłuszczu; HF) (Research Diets Inc.) w 4 tygodniu życia (czas 0 tygodni punkt). Zwierzęta uśmiercono po określonej liczbie tygodni na diecie (0 tygodni, n = 10 na grupę, 3 tygodnie, n = 3 na grupę, 6 tygodni, n = 10 na grupę, 8 tygodni, n = 3 na grupę; 11 tygodnie, n = 3 na grupę, 16 tygodni, n = 10 na grupę, 26 tygodni, n = 10 na grupę) [patrz też: przerost mięśnia sercowego, turnusy rehabilitacyjne krynica zdrój, jaka sukienka na studniówkę ] [przypisy: damar ruda śląska, aceklofenak, otifree ]