Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością ad 6

W celu określenia źródła tego sygnału porównano skrawki tkanki tłuszczowej z myszami typu dzikiego i ob / ob. Różnice morfologiczne były uderzające. Poza dobrze udokumentowaną różnicą w wielkości adipocytów z myszy typu dzikiego i ob / ob, istniały skupienia tego, co wydawało się być małymi, jądrzastymi komórkami w przestrzeniach śródmiąższowych między adipocytami w tkankach tłuszczowych ob / ob, w przeciwieństwie do bliskiej nieobecności takich komórek w kontrolnych częściach myszy (Figura 5a). Gdy otyłe myszy były w wieku 5 miesięcy, te skupienia komórek stały się bardziej rozpowszechnione, a adipocyty wykazywały wczesne cechy lipolizy przejawiające się kurczeniem komórek wieloogniskowych (Figura 5b). Hybrydyzacja in situ i barwienie immunohistochemiczne z użyciem sond i przeciwciał F4 / 80 RNA pokazały, że ekspresja F4 / 80 była ograniczona do tych klastrów małych, zarodkowanych komórek (Figura 5, c i d). Podobne wyniki zaobserwowano również w przypadku innych genów zapalenia, potwierdzając wyniki za pomocą F4 / 80 (dane nie przedstawione). Brak kosztów związanych z cząsteczką adhezyjną komórek śródbłonka płytek (PECAM), naczyniowy marker śródbłonka, wykluczał udział komórek śródbłonka (dane nie pokazane). Figura 5 Porównanie histologiczne między WAT typu dzikiego i ob / ob oraz komórkami zrębowo-naczyniowego. Dla każdego panelu, typ dziki w × 100 jest widoczny po lewej stronie, ob / ob przy × 100 w środku, a ob / ob przy × 400 po prawej stronie. (a) Różnice morfologiczne WAT po 3 miesiącach (błękit toluidynowy O na skrawkach parafiny). Zwróć uwagę na obecność zarodkowanych komórek zrębowych w dużym powiększeniu typu ob / ob po prawej stronie. (b) Różnice morfologiczne WAT po 5 miesiącach (błękit toluidynowy O na skrawkach parafiny). Zrębowe komórki wielojądrowe zwiększyły się w typie ob / ob widocznym po prawej stronie, z wczesnymi cechami lipolizy w adipocytach ob / ob, objawiających się kurczeniem się komórek wieloogniskowych. (c) WAT po 3 miesiącach sondowanych antysensownym RNA F4 / 80 (hybrydyzacja in situ na świeżo zamrożonych skrawkach). (d) WAT po 3 miesiącach barwienia immunologicznego przeciwciałem anty-F4 / 80 (immunohistochemia na skrawkach parafiny, brązowe zabarwienie). (e) Pierwotne komórki zrębowe z 5-miesięcznych myszy, barwione immunologicznie przeciwciałem anty-F4 / 80 (czerwone zabarwienie). (f) Pierwotne komórki zrębowe-naczyniowe od 5-miesięcznych myszy barwione czerwienią olejową O. W celu dalszego ustalenia, że te komórki nie były preadipocytami, frakcje zrębu-naczyń z dzikich i ob / ob tkanek tłuszczowych wysiewano na szkiełka i barwione przeciwciałem anty-F4 / 80. Większość komórek zrębowych z WAT typu dzikiego okazała się fibroblastami, prawdopodobnie preadipocytami, i były F4 / 80 ujemne. Z drugiej strony w frakcji zrębu-naczynia u myszy ob / ob były liczne komórki F4 / 80.-dodatnie. Wiele z tych komórek zawierało wiele jąder, przypominających komórki olbrzymie (rysunek 5e). Ogromne komórki powstają w wyniku fuzji wielu makrofagów i są obserwowane w przypadkach przewlekłego stanu zapalnego i ziarniniaka (27). U myszy w wieku 5 miesięcy określono (poprzez pozytywne barwienie F4 / 80), że 2% komórek typu dzikiego i 33% komórek obromowych z ob-ob było makrofagami. Jak pokazano na Figurze 5f, komórki F4 / 80P-dodatnie zawierały również wiele czerwonych zabarwionych olejem O3 pęcherzyków, co wskazuje na śródplazmatyczną akumulację lipidów. Ta obserwacja jest zgodna z histiocytową (fagocytarną) aktywnością. Barwiliśmy również komórki zrębowe dla specyficznego dla limfocytów T markera CD3, markera specyficznego dla limfocytów B CD72 i markera specyficznego dla granulocytów Ly6G (dane nie przedstawione). Z czterech testowanych typów komórek zaobserwowano jedynie makrofagi w WAT. Na tej podstawie dochodzimy do wniosku, że istnieje znacząca akumulacja makrofagów w WAT podczas rozwoju otyłości. Rozyglitazon obniża poziom mRNA genów zapalenia. PPAR. jest członkiem rodziny receptorów hormonów jądrowych. Jest to decydujący czynnik transkrypcyjny regulujący różnicowanie adipocytów (28, 29). PPAR. agoniści, w tym troglitazon, pioglitazon i rozyglitazon, są nową i bardzo skuteczną klasą leków uwrażliwiających na insulinę, znanych jako tiazolidynodiony (TZD). Aby zbadać związek insulinooporności i stanu zapalnego w tkance tłuszczowej z innej perspektywy, leczono myszy ob / ob za pomocą rozyglitazonu, PPAR. agonista. Jak pokazano na Figurze 6, ADAM8, MAC-1, F4 / 80 i CD68 wykazały statystycznie istotne zmniejszenie poziomów ekspresji po leczeniu. MIP-1. i ekspresja MCP-1 również spadła, ale nie osiągnęła istotności statystycznej. Figura 6 Ekspresja ADAM8, MIP-1 (3, MCP-1, MAC-1, F4 / 80 i CD68 w ob / ob WAT leczonych rozyglitazonem. 12-tygodniowe myszy ob / ob traktowano 15 mg / kg rozyglitazonu (Rosi) lub nośnikiem (sterylna woda; Veh) przez 28 kolejnych dni (n = 10 w każdej grupie)
[podobne: linka treningowa dla psa, alzheimer pierwsze objawy, przeglądarka skierowań sanatoryjnych nfz ]
[patrz też: najsmieszniejsze nazwiska, pro kolin, sinulan ulotka ]