Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością ad 5

Z drugiej strony, w mięśniach i wątrobie, dwóch innych ważnych tkankach do działania insuliny, ekspresja mRNA tych genów była ledwo wykrywalna i zasadniczo niezmieniona u tych otyłych myszy (dane nie przedstawione). Aby dowiedzieć się, czy podobne aktywności zapalne występują w innych tkankach bogatych w makrofagi, porównaliśmy ekspresję ADAM8, MIP-1 ., MCP-1, MAC-1, F4 / 80 i CD68 w płucach, śledzionie i WAT w ob / ob i db / db myszy z tymi w kontrolach Lean dla miotu. W sumie w genach otyłych stwierdzono niewielką zmianę tych genów w płucach i śledzionie (ryc. 3). W badaniu progresji po 26 tygodniach stosowania diety wysokotłuszczowej zaobserwowano znaczącą regulację CD68 w wątrobie, chociaż bezwzględny poziom ekspresji był znacznie niższy niż w przypadku tłuszczu. Figura 3 Regulacja transkrypcji ADAM8, MIP-1 ., MCP-1, MAC-1, F4 / 80 i CD68 w tkankach bogatych w makrofagi (WAT, płuca i śledziona) myszy ob / ob i db / db. Dla porównania poziom ekspresji genu u myszy szczupłych ustalono arbitralnie na 1; słupki błędu reprezentują. SE. y osie pokazują arbitralne jednostki reprezentujące względne poziomy ekspresji mRNA. Ekspresja genów zapalnych jest ograniczona lub wzbogacona w makrofagi. Aby uporządkować typy komórek, w których ekspresjonowano te geny, rozdzieliliśmy komórki w WAT na dwie frakcje: adipocyty i komórki zrębowe. Jak pokazano na Fig. 4, analiza TaqMan ujawniła, że badane geny zapalne były wyrażane głównie w frakcji zrębowej-naczyniowej, gdzie mogą znajdować się makrofagi. Geny te były wyrażane na znacznie niższych poziomach we frakcji adypocytów. W szczególności TNF-a i IKK ., dwa geny zapalne związane z indukowaną przez otyłość opornością na insulinę przez badania utraty funkcji, były również bardziej obfite we frakcji zrębowej-naczyniowej. Aby kontrolować jakość RNA z adipocytów, leptyna, hormon specyficzny dla adipocytów, został użyty jako marker do wykazania, że frakcjonowanie zostało wykonane prawidłowo. Wzór ekspresji genów zapalenia był dalej badany w wielu tkankach, w tym w tkance tłuszczowej i pierwotnych makrofagach izolowanych z jamy otrzewnowej normalnych myszy. Zgodnie z istniejącymi dowodami, geny te ulegały ekspresji na najwyższych poziomach w pierwotnej populacji makrofagów, a następnie WAT, co pokazuje, że WAT normalnie wzbogaca się w makrofagi (dane nie pokazane). Figura 4: Ekspresja mRNA ADAM8, MIP-1 A, MCP-1, MAC-1, F4 / 80 i CD68 w frakcjach zrębowych-naczyniowych i adypocytarnych. W celu kontroli jakości badano leptynę w tych próbkach. Aby porównać z ekspresją znanych genów zapalnych tkanki tłuszczowej, TNF-a i IKK. Ekspresja została również zbadana. W przypadku genów wyrażanych głównie w frakcji zrębowej-naczyniowej, ekspresja w adipocytach została ustalona na 1; słupki błędu reprezentują. SE. W przypadku leptyny ekspresja w komórkach zrębowych została ustalona na 1. y osiach pokazujących arbitralne jednostki reprezentujące względne poziomy ekspresji mRNA. Ponieważ frakcja zrębowo-naczyniowa z tłuszczu zawiera kilka typów komórek, w tym preadipocyty, ważne było określenie, które komórki w obrębie frakcji zrębowej znacząco eksprymują te geny zapalne. Aby odpowiedzieć na to pytanie, dwie hodowane linie komórkowe preadipocytów, 3T3-L1 i 3T3-F442A, stymulowano do poddania adipogenezie. Analiza TaqMan wykazała, że ADAM8, MIP-1 (3, F4 / 80 i MAC-1 nie były wykrywalne ani w preadipocytach, ani adipocytach. CD68 miał tylko bardzo niski poziom ekspresji w adipocytach, podczas gdy MCP-1 wykazywał umiarkowaną ekspresję w preadipocytach (dane nie pokazane). Ostatnie dowody wskazują, że preadipocyty mają potencjał do transdyferencjacji. do makrofagów (26). Aby zbadać możliwość, że preadipocyty mogą wyrażać te stany zapalne i geny makrofagów w środowisku zapalnym, użyliśmy cytokin o podwyższonej regulacji w stanie otyłym, TNF-a, MIP-1 (3 i MCP-1, jak również ogólnych bodźców zapalnych (LPS i PMA) w celu stymulacji preadipocytów 3T3-L1 przez 16 godzin. Podczas gdy leczenie tymi bodźcami zapalnymi nie zwiększyło ekspresji genów markerowych makrofagów (MAC-1, F4 / 80 i CD68) w preadipocytach 3T3-L1, TNF-a. w znacznym stopniu stymulowały ekspresję ADAM8, MIP-1 (3 i MCP-1 w preadipocytach 3T3-L1 (Supplemental Figure 1, http://www.jci.org/cgi/content/full/112/12/1821/DC1 ). Sugeruje to, że bodźce zapalne związane z otyłością mogą wyzwalać preadipocyty w celu zwiększenia ekspresji niektórych, ale nie wszystkich, genów zapalnych w określonych warunkach. Zmiany morfologiczne WAT w otyłości. Pozorna regulacja ekspresji genów może być konsekwencją zarówno zwiększonej transkrypcji w istniejących makrofagach, jak i zwiększonej infiltracji makrofagów do WAT u otyłych myszy.
[podobne: przeglądarka skierowań sanatoryjnych nfz, isonasin, sennik koleżanka z pracy ]
[hasła pokrewne: mały weterynarz, isonasin, trosicam 15 mg ]