Inhibitor PKC AEB071 może być terapeutyczną opcją dla łuszczycy ad

Nie hamuje innych kinaz zaangażowanych w sygnalizację komórkową, w tym fyn, lck, ZAP-70 i JAK3 (J. Wagner, niepublikowane obserwacje). Wartości KI są w pikomolach dla izotypów PKC. (0,95 nM),. (0,64 nM) i. (0,22 nM). AEB071 także hamuje izoformy PKC a, P i a, z wartościami KI między 1,8 a 3,2 nM. In vitro AEB071 wykazał silny wpływ na proliferację limfocytów T (Figura 1A) i wytwarzanie cytokin przez komórki T aktywowane anty-CD3 / anty-CD28. IL-17 (Figura 1A), IFN-a, IL-2 i TNF-a były hamowane przy wartościach IC50 poniżej 100 nM (dane nie przedstawione). Monofity pochodzące z monocytów krwi ludzkiej reagowały na AEB071 i były hamowane w celu wytworzenia IL-23 (IC50, 16 nM) i TNF-a. (IC50, 74 nM) (Figura 1B). Bardzo podobne wyniki zaobserwowano dla komórek dendrytycznych pochodzących z monocytów (dane nie pokazane). Również IL-8 i TNF-a wytwarzanie przez aktywowane ludzkie keratynocyty było hamowane przy wartościach IC50 około nM (Figura 1C). Ponadto doustnie podawany AEB071 w sposób zależny od dawki i znacząco hamował ostrą reakcję alergicznego kontaktowego zapalenia skóry u szczurów (Figura 1D). Zatem AEB071 wykazuje profil farmakologiczny in vitro i in vivo zgodny z jego zdolnością do hamowania różnych izoform PKC w komórkach potencjalnie zaangażowanych w zaburzenia zapalne skóry ludzi. Figura 1AEB071 hamuje proliferację limfocytów T, wytwarzanie cytokin in vitro i ostre kontaktowe zapalenie skóry in vivo. (A) Proliferacja komórek T indukowana przez stymulację PBMC z rozpuszczalnymi mAb anty-CD3 i anty-CD28. Pokazano wyniki z z 4 eksperymentów. IC50, 108 nM. Wytwarzanie IL-17 w tych samych warunkach, IC50 84 nM (1 z 2 eksperymentów). (B) Hamowanie IL-23 (IC50, 16 nM) i TNF-a (IC50, 74 nM) wytwarzanie przez makrofagi ludzkie aktywowane zymosanem. Dane pochodzą z z 2 eksperymentów. (C) Hamowanie IL-8 (IC50, 2,8 nM) i TNF-a (IC50, 1,4 nM) wytwarzanie normalnych ludzkich keratynocytów aktywowanych PMA. (D) Hamowanie alergicznego kontaktowego zapalenia skóry szczura przez doustne dawkowanie 10 mg (P = 0,055 w stosunku do kontroli z podłożem) i 30 mg (P = 0,002 w porównaniu z kontrolą nośnika) AEB071 ocenianej przez zgrubienie skóry bocznej w grupach po 5 zwierząt każda. Dane są średnie. SD. AEB071 podawany ochotnikom w dawce pojedynczej do 500 mg jest dobrze tolerowany i hamuje zależną od PKC proliferację PKC i wytwarzanie IL-2 przez aktywowane limfocyty T Aby zbadać ogólne bezpieczeństwo i tolerancję, rekrutowano w sumie 48 zdrowych ochotników. Sześć osobników na kohortę leczono rosnącymi pojedynczymi dawkami doustnymi AEB071 (10, 25, 50, 100, 200 i 500 mg), a 12 osobników otrzymywało placebo. Ogólnie AEB071 był dobrze tolerowany z całkowitą liczbą 12 niezależnych od dawki zdarzeń niepożądanych (AE), z których żadna nie była poważna. Obejmowały one bóle głowy, nocne poty, niestrawność, nudności i zawroty głowy w grupach z aktywną dawką. Zgłaszano jedno zdarzenie niepożądane (biegunkę) u pacjenta leczonego placebo. Obserwowano odwracalny wzrost średniej częstotliwości rytmu komór przy poziomie dawki 500 mg AEB071 w porównaniu z placebo. Wzrost częstości akcji serca (7% do 23%, dane EKG) był przejściowy i trwał od 3 do 12 godzin po podaniu dawki, osiągając maksimum po 6 godzinach po podaniu. Jednak średnie tętno nadal mieściło się w górnej granicy prawidłowego zakresu i dlatego nie uznano ich za nieprawidłowy tachykardię. Próbki krwi obwodowej pobierano w odstępach czasu w celu zbadania funkcji komórek T zależnych od PKC ex vivo. Jak pokazano na Figurze 2A, było zależne od dawki hamowanie proliferacji komórek T indukowane przez mitogen PHA osiągający najwyższą wartość w ciągu do 3 godzin po podaniu doustnym i powrót do poziomów wyjściowych 12 godzin po dawce. Podobnie, poziomy mRNA IL2 indukowane przez aktywator PKC PMA i stymulowany anty-CD28 były zmniejszone maksymalnie w 3 godziny po dawce (Figura 2B). Te działania farmakodynamiczne korelowały z poziomami leku AEB071 we krwi obwodowej. Figura 2 Analiza ex vivo krwi obwodowej zdrowych ochotników eksponowanych na AEB071. (A) Pobrano krew obwodową od osób narażonych na pojedyncze dawki 100, 200 lub 500 mg AEB071 lub placebo i stymulowano fitohemaglutyniną. Proliferację mierzono przez inkorporację [3H] -tymidyny. Dane pokazują średnią geometryczną 6 osobników na kohortę w cpm. Punkt czasowy 0 odzwierciedla próbkę krwi pobraną przed podaniem. Aby ustalić wariacje na linii podstawowej, pobrano próbki krwi w punktach czasowych 24, 23, 23, 20 i 18 godzin w dniu poprzedzającym dawkowanie. (B) Krew obwodową pobierano podobnie jak opisano w A i stymulowano przeciwciałami PMA i anty-CD28. Poziomy mRNA IL2 mierzono za pomocą ilościowego RT-PCR
[przypisy: alzheimer pierwsze objawy, mały weterynarz, siódmy syn chomikuj ]
[przypisy: bioxetin opinie, siódmy syn chomikuj, masc ochronna z wit a ]