Inhibitor PKC AEB071 może być terapeutyczną opcją dla łuszczycy ad 8

Badanie przeprowadzono w 2 lokalizacjach w Wiedniu, Austrii oraz w Manchesterze w Wielkiej Brytanii i zostało zatwierdzone przez lokalne komisje etyczne (z Uniwersytetu Medycznego w Wiedniu i Uniwersytetu Medycznego w Manchesterze) oraz władze służby zdrowia (Bundesministerium für Gesundheit, Wiedeń , Austria, oraz Agencja Regulacyjna ds. Leków i Produktów Medycznych, Londyn, Zjednoczone Królestwo). Do badania zakwalifikowano pacjentów w wieku od 18 do 65 lat ze stabilną łuszczycą zwykłą na płytce nazębnej i innych istotnych klinicznie nieprawidłowości. Pacjenci byli hospitalizowani na tygodnie i 2 badania i byli dalej dokładnie monitorowani jako ambulatoryjni co tydzień podczas 3 i 4. tygodnia badania. Cztery kolejne kohorty po 8 pacjentów leczono doustnym AEB071 przez 2 tygodnie z rosnącymi dawkami (6 pacjentów w każdej grupie). kohorta) lub z placebo (2 pacjentów w każdej kohorcie). Podano eskalujące dawki AEB071 (25, 100, 200 i 300 mg bid). Rozpoczęcie następnego wyższego poziomu dawki było dozwolone dopiero po wykazaniu tolerancji i bezpieczeństwa przy poprzedniej niższej dawce. Ciśnienie krwi, częstość tętna, oceny EKG i parametry laboratoryjne hematologii / chemii krwi były ściśle monitorowane od dnia i przez cały okres badania, włącznie z okresem obserwacji w dniach 21 i 28. Klirens kreatyniny oznaczono w dniach. 14. Stopień nasilenia choroby oceniano co tydzień przy użyciu PASI (17), zatwierdzonej punktacji szeroko stosowanej w badaniach klinicznych nad łuszczycą. Biopsje skóry (5 mm) pobierano z typowych łuszczycowych płytek od wszystkich pacjentów w punkcie wyjściowym (dzień 0), dzień 7 i dzień 14 (koniec okresu leczenia). Epidermalne zgrubienie i wyliczenie komórek CD3 +, CD14 +, CD15 +, CD207 + i Ki-67 + razem z oceną K16 analizowano jak opisano wcześniej (46). Barwienie cytokinami immunohistochemicznymi. Zamrożoną tkankę pocięto na sekcje o średnicy 5 urn i zamontowano na szkiełkach mikroskopowych z szparą kapilarną (Dako). W celu określenia rozkładu i liczby komórek IL-1 (3 + lub p40 + wykonano pojedyncze immunostarzenie (anty-p40: klon 31052, mIgG1, R & D, klon anty-IL-1 (x: 2D8, mIgG1, Abcam). Skrawki kriostatu suszono powietrzem przez 20 minut, utrwalano w schłodzonym lodem acetonie przez 10 minut i albo natychmiast zabarwiono, albo przechowywano w temperaturze ~ 20 ° C. Dodatkowy etap utrwalania przeprowadzono z 2% paraformaldehydem (Sigma-Aldrich) w PBS przez 5 min. Po przemyciu 0,05% Tween (Bio-Rad Laboratories) w PBS (Gibco), szkiełka zostały zablokowane 1% BSA i 0,05% Tween w PBS i, po przemyciu 0,05% Tween w PBS, 5% surowicą końską i % saponiny (Sigma-Aldrich) w PBS, aby zapobiec nieswoistemu wiązaniu białka. Przeciwciało monoklonalne izotypu IgG1 zastosowano jako kontrolę ujemną. W celu wykrycia pierwszorzędowego przeciwciała użyto biotynylowanej końskiej anty-mysiej IgG (Vector Laboratories), a następnie inkubowano z peroksydazą awidyny. W celu wizualizacji pozytywnie zabarwionych komórek jako chromogen zastosowano 0,01% 3-amino-9-etylo-karbazolu w 50 mM buforze octanowym (pH 5, 0,015% H2O 2,5% dimetyloformamidu). Skrawki wybarwiono kontrastowo hematoksyliną. Ocena farmakokinetyczna Do badania pojedynczej dawki u zdrowych ochotników pobierano próbki krwi przed podaniem dawki oraz 0,25, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 24, 36, 48, 72, i 96 godzin po podaniu. W badaniu dotyczącym łuszczycy próbki krwi pobrano przed dawką oraz 1, 2, 4, 6, 8 i 12 godzin po porannej dawce w dniu iw dniu 14. Poziom Cmin ustalono również przed pierwszą poranną dawką w dniach 2, 4, 6, 8, 10 i 12. Biopsję skóry pobrano z typowej zmiany łuszczycowej od wszystkich pacjentów w dniu 14 około 4 godziny po porannej dawce. Stężenia AEB071 analizowano metodą LC / MS z limitem oznaczania ilościowego 3 ng / ml (krew) i 12 ng / g (skóra). Analizę danych farmakokinetycznych przeprowadzono przy użyciu standardowego podejścia niekompartmentowego, a parametry uzyskano przy użyciu oprogramowania WinNonlin 5.0 (Pharsight). Statystyka W badaniu pojedynczej dawki oceny farmakodynamiczne podsumowano za pomocą statystyki opisowej. Procent zahamowania proliferacji limfocytów i ekspresji mRNA IL2 w porównaniu z wartością wyjściową podsumowano podobnie. W badaniu obejmującym wiele dawek, procentowe hamowanie w porównaniu z wartością wyjściową w skali PASI analizowano za pomocą liniowego modelu efektów mieszanych dostosowanego do poziomu początkowego, grupy leczenia, dnia badania i dnia badania. interakcja grupowa. Dla każdej dawki AEB071 oszacowanie średniej różnicy w stosunku do placebo (i związanego z nią 95% CI) uzyskano z modelu w każdym tygodniu. Zmianę w stosunku do linii bazowej punktów końcowych histologii skóry analizowano podobnie Wyjściowe poziomy porównano z poziomami po linii bazowej, stosując dwuprzegubowy test t dla pary na poziomie istotności 5%. Podsumowano także częstość występowania AE. Podziękowania Dziękujemy Gerdzie Herzig i Nicole Schöfmann za doskonałą pomoc techniczną dla badań in vitro oraz Josiane Bringel i Magali Marcellin za ekstrakcję RNA i pomiary mRNA IL2. Przypisy Niestandardowe skróty: AE, zdarzenie niepożądane; Cmax, maksymalne stężenie w osoczu; PASI, wskaźnik ostrości powierzchni łuszczycy. Konflikt interesów: Badanie to było sponsorowane przez Novartis Exploratory Development i Novartis Institutes for Biomedical Research. B. Wolff, JG Meingassner, H. Knight, T. Dumortier, C. Burkhart, O. Grenet, J. Wagner, Y. Hijazi, RE Morris, C. McGeown, C. Rordorf i T. Jung są pracownikami Novartis. CEM Griffiths i G. Stingl wcześniej otrzymali od firmy Novartis opłaty za doradztwo. Informacje referencyjne: J. Clin. Invest.118: 3151. 3159 (2008). doi: 10.1172 / JCI35636
[patrz też: jak oduczyć psa skakania na ludzi, krem ziaja liście manuka, koktajl spalający tłuszcz ]
[więcej w: pro kolin, sinulan ulotka, jak oduczyć psa skakania ]