Inhibitor PKC AEB071 może być terapeutyczną opcją dla łuszczycy ad 6

Potwierdzają to analizy immunohistologiczne. Po tygodniu leczenia zaobserwowano tendencję do poprawy, a po 2 tygodniach skóra była histologicznie prawie normalna u pacjentów leczonych najwyższą dawką. AEB071 był bardzo skuteczny w zmniejszaniu liczby komórek p40 + skóry właściwej. Co ciekawe, redukcja komórek z ekspresją p40 + była widoczna już po tygodniu, a więc poprzedzała inne histologiczne, a także kliniczne kryteria odpowiedzi na leczenie. Chociaż to pozostawia otwartą kwestię, czy IL-12, IL-23 lub obie cytokiny dzielące się na P40 są zahamowane, sugeruje to, że AEB071 może hamować zarówno szlak Th1, jak i Th17, z których oba są aktywowane w łuszczycy (22, 37). Zatem, zmniejszenie p40 wraz z hamowaniem TNF-a produkcja może wystarczająco wyjaśnić mechanizm, dzięki któremu AEB071 indukuje silną odpowiedź kliniczną. Fakt, że IL-1. wytwarzanie przez komórki w skórze właściwej i przez aktywowane makrofagi in vitro nie było hamowane (IC50 wynoszące 10 (3 M w 3 eksperymentach) sugeruje, że IL-1P nie odgrywa istotnej roli w łuszczycy. Jednak formalny dowód nie został jeszcze dostarczony. Oprócz komórek T, komórek dendrytycznych i makrofagów, keratynocyty mogą odgrywać główną rolę w patogenezie łuszczycy. Ligandy witaminy D lub receptorów retinoidowych indukują różnicowanie komórek naskórka i są skuteczne w leczeniu łuszczycy (38, 39). Transgeniczne myszy z nadekspresją naskórkowego VEGF (15) lub STAT3 (16) rozwijają kliniczne i histologiczne uszkodzenia typowe dla łuszczycy. U ludzi nadekspresja VEGF i fosforylowanego STAT3 są cechami łuszczycy (16, 40). Izoformy PKC eksprymowane w keratynocytach mogą przyczyniać się do tych zmian. Wykazano, że STAT3 jest fosforylowany w resztach Ser727 przez PKCy i PKC2. myszy transgeniczne wykazują fosforylację reszt Ser727 i Tyr705, a zatem wykazują w pełni aktywowaną STAT3 (41). Specyficzna wobec keratynocyta nadekspresja PKC. u myszy powoduje ekspresję TNF-a oraz VEGF i naskórkowe zapalenie neutrofilowe (42, 43), tj. charakterystyczne cechy łuszczycy. To K5-PKC. mysz transgeniczna wymaga aktywacji estru forbolu w celu wywołania silnego zapalenia skóry, w którym IL-8 ulega nadmiernej ekspresji i która może być specyficznie blokowana przez PKC. inhibitor (44). Zgodnie z tym stwierdziliśmy, że IL-8 indukowana przez fobbol-a i TNF-a produkcja przez keratynocyty została całkowicie zablokowana przez AEB071, co wskazuje, że AEB071 rzeczywiście hamuje aktywność PKC w aktywowanych ludzkich keratynocytach. Komórki T mogą być aktywowane w węzłach chłonnych, a następnie infiltrowane do skóry lub aktywowane przez komórki dendrytyczne i / lub keratynocyty (45) miejscowo w skórze. Nie wiadomo, w jaki sposób wrażliwe komórki T naciekające skórę są zahamowane przez AEB071, w porównaniu z limfocytami T w spoczynku obwodowym. Przedstawione tu dane sugerują, że ekspozycja na skórę około .M osiągnięta przy 200 mg bid była związana ze skutecznością kliniczną. W przeciwieństwie do tego, szczytową ekspozycję na krew około (3M AEB071, co spowodowało 50% zahamowanie proliferacji limfocytów T i ekspresję mRNA IL2, uzyskano przy pojedynczej dawce 100 mg AEB071, dawce, która była klinicznie tylko minimalnie skuteczna. Sugeruje to, że preaktywowane komórki T naciekające skórę są mniej wrażliwe na AEB071 w porównaniu z odpoczynkowymi komórkami T. Podsumowując, niniejszy raport opisuje, co według naszej wiedzy jest pierwszym badaniem inhibitora PKC w chorobie autoimmunologicznej. Zdolność farmakologiczna AEB071 do hamowania różnych izoform PKC o różnej sile działania i selektywności względem PKC w stosunku do innych kinaz czyni go potencjalnym kandydatem do skutecznego leczenia szeregu chorób autoimmunologicznych. Biorąc pod uwagę wszechobecną ekspresję PKC i związane z nią potencjalne obawy dotyczące bezpieczeństwa, tolerancja i brak toksycznych zdarzeń w prezentowanych badaniach jest zachęcająca do dalszych badań w celu ustalenia długoterminowego bezpieczeństwa i skuteczności klinicznej w łuszczycy i innych chorobach autoimmunologicznych. Metody Eksperymenty in vitro Ludzkie PBMC wyizolowane z kożuszków leukocytarnych inkubowano ze stopniowanymi stężeniami AEB071 i stymulowano przez 72 godziny anty-CD3 (klon SPV-T3 / 1, izotyp IgG2a, przygotowany w Instytucie Badań Biomedycznych Novartis) i anty-CD28 ( BD Biosciences) w stężeniu .g / ml każdy. W celu określenia proliferacji komórek zastosowano test inkorporacji BrdU (Roche). Wytwarzanie IL-17 analizowano po 24 godzinach hodowli testem ELISA (R & D Systems). Pierwotne ludzkie keratynocyty wyizolowane z tkanki piersi po zabiegach redukcyjnych hodowano w podłożu wzrostowym keratynocytów (Clonetics) uzupełnionym 10% dezaktywowanym termicznie FCS (HyClone), mM glutaminy, 100 U / ml penicyliny / 100 ug / ml streptomycyny (oba z Gibco) i 0,06 mM wapnia
[patrz też: turnusy rehabilitacyjne krynica zdrój, sennik koleżanka z pracy, mały weterynarz ]
[patrz też: aceklofenak, otifree, mały weterynarz ]