Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 5

Bardzo ciężka choroba u myszy DR3 TG immunizowanych S-Ag. Zwróć uwagę na całkowite zniszczenie warstw komórek fotoreceptorów, w tym komórek fotoreceptorów (H & E, x 200). Figura 2 Wrażliwość myszy HLA TG na indukowaną IRBP EAU. Bary są średnią ocen chorobowych. Częstość występowania choroby (dodatnia wśród wszystkich myszy) znajduje się obok każdego paska. Szczepy HLA TG znajdują się w górnym panelu, a szczepy kontrolne w dolnym panelu. Jeśli tylko jedno oko wykazywało chorobę, zwierzę oceniano jako pozytywne, a jego wynik rejestrowano jako średnią obu oczu. Pokazane są połączone wyniki pięciu eksperymentów. Znacząca różnica (P. 0,05) od kontroli C57BL jest wskazywana gwiazdką. Ponieważ nie zaobserwowano widocznych różnic w parametrach choroby u myszy HLA TG eksprymujących lub nie wyrażających mysich cząsteczek IE, ich rola, gdy obecna jest ludzka cząsteczka klasy II, wydaje się być podrzędna. Niemniej jednak, gdy ludzka klasa II jest nieobecna, tak jak u myszy E. K / E. BA. 0, sama obecność mysiego IE jest wystarczająca, aby pozwolić na rozwój EAU. Myszy DR3 TG są wrażliwe na EAU indukowaną przez S-Ag. Pacjenci z zapaleniem błony naczyniowej oka często wykazują silne odpowiedzi limfocytów na S-Ag, ale tylko sporadyczne odpowiedzi na IRBP (12, 36). Chociaż S-Ag wykazuje działanie uodajne na inne gatunki zwierząt, to liczne testowane dotąd szczepy okazały się wysoce oporne na indukcję choroby za pomocą S-Ag (14, 15). Co ciekawe, myszy HLA-DR3 TG immunizowane bS-Ag rozwinęły bardzo ciężką chorobę, a wiele indywidualnych myszy osiągnęło ocenę choroby 4, co odpowiada całkowitemu zniszczeniu warstwy komórek fotoreceptorów i rozległemu uszkodzeniu innych warstw siatkówki (Figura 1d i Figura 3). ). Myszy HLA-DQ6 i -DQ8 również rozwinęły pewną chorobę, aczkolwiek przy znacznie niższych wynikach i mniejszej częstości występowania (Figura 3). Żaden z innych szczepów TG lub którejkolwiek z sześciu kontrolnych myszy A. 0 nie rozwinął choroby po immunizacji S-Ag (danych nie pokazano). Myszy typu dzikiego również były oporne na choroby, potwierdzając wcześniej opublikowane dane (14) (nie pokazano). Pojawienie się choroby indukowanej przez S-Ag. U myszy DR3 TG, które cechowały się charakterystycznymi cechami choroby, wydawało się opóźnione o kilka dni do tygodnia w porównaniu z chorobą indukowaną IRBP. Jest to podobne do wcześniejszego pojawienia się EAU indukowanego IRBP niż EAU S-Ag obserwowanego u szczurów i może odzwierciedlać różnicę w dostępności docelowego antygenu (S-Ag jest wewnątrzkomórkowe w komórkach fotoreceptorów, podczas gdy IRBP jest wydzielany do matryca interfektoreceptorów) (37). Figura 3 Wrażliwość myszy HLA TG na indukowaną przez S-Ag. EAU. Pokazano połączone wyniki pięciu eksperymentów z użyciem bS-Ag i jednego doświadczenia z zastosowaniem rekombinowanej hS-Ag. Inne szczepy TG były ujemne. Kontrolne myszy A. 0 immunizowane bS-Ag (n = 6) i myszy C57BL / 10 typu dzikiego immunizowane hS-Ag (n = 4) lub bS-Ag (n = 19) nie rozwinęły choroby. Istotne różnice (P. 0,05) od C57BL i A. 0 są oznaczone gwiazdkami. W sekwencji aminokwasowej między człowiekiem a bS-Ag występuje około 80% homologii. Aby sprawdzić, czy to przełożyło się na różnice w patogenności, immunizowaliśmy myszy HLA TG rekombinowanym hS-Ag. Myszy DR3 i DQ8 TG rozwinęły EAU po immunizacji rekombinowanym hS-Ag z ocenami podobnymi do EAU opracowanych w odpowiedzi na bS-Ag (Figura 3). Odkrycie to ma szczególne znaczenie ze względu na silne reakcje ludzi na S-Ag, które prawdopodobnie rozwinęły się jako odpowiedzi na autologiczną cząsteczkę ludzką. Myszy HLA-DR4 TG i wszystkie szczepy kontrolne, w tym typ dziki, były oporne (dane nie pokazane). Antygen siatkówki jest prezentowany i rozpoznawany na ludzkich cząsteczkach MHC. Ponieważ szczepy DR (choć nie DQ) zachowują mysz E ., a w przypadku DR4 także E. cząsteczkę, konieczne było sprawdzenie, czy antygen może być prezentowany produktywnie na cząsteczkach ludzkiej klasy II. Dokonano tego za pomocą badań blokowania proliferacji limfocytów przy użyciu odpowiednich przeciwciał monoklonalnych. Usuwano komórki węzłów chłonnych od myszy immunizowanych IRBP lub bS-Ag i stymulowano je w hodowli z odpowiednim antygenem. Odpowiedzi proliferacyjne obserwowano we wszystkich szczepach z wyjątkiem Ap, który jest pozbawiony jakichkolwiek cząsteczek klasy II. U myszy HLA-DR3, -DQ6 i -DQ8 TG proliferacja w odpowiedzi na S-Ag była blokowana przez specyficzne przeciwciała monoklonalne przeciwko ludzkiej, ale nie dla mysich, cząsteczek MHC klasy II (Figura 4). U myszy E. K / E. BA0 .DR4 TG, które współeksprymują cząsteczki DR i IE, oba przeciwciała anty-DR i anty-IE znosiły proliferację, co wskazuje, że obie cząsteczki klasy II były funkcjonalnie zaangażowane w prezentację antygenu. Podobny wzór zaobserwowano dla komórek węzłów chłonnych HLA TG myszy immunizowanych IRBP (dane nie przedstawione)
[patrz też: krem ziaja liście manuka, nfz warszawa leczenie uzdrowiskowe, przychodnia góra kalwaria ]
[podobne: aceklofenak, otifree, mały weterynarz ]