Hamowanie PKC łagodzi fenotyp serca w mysim modelu dystrofii miotonicznej typu 1

Powikłania sercowe są częstą przyczyną śmierci u osób z dziedziczną wielonarządową chorobą dystrofią miotoniczną typu (DM1). Charakterystyczną cechą molekularną DM1 jest niewłaściwa regulacja alternatywnego splicingu spowodowana zakłóconym funkcjonowaniem regulatorów splicingu typu muscleblind-like 1 (MBNL1) i białka wiążącego CUG (CUGBP1). CUGBP1 jest regulowany w górę w DM1 z powodu aktywacji szlaku PKC, a następnie hiperfosforylacji i stabilizacji białka CUGBP1. Tutaj zablokowaliśmy aktywność PKC w specyficznym dla serca modelu myszy DM1 w celu określenia jego patogennej roli w DM1. Zwierzęta, którym podano inhibitory PKC, wykazywały znacznie zwiększone przeżycie, które korelowało ze zmniejszoną fosforylacją i zmniejszonymi poziomami CUGBP1 w stanie stacjonarnym. Badania czynnościowe wykazały, że hamowanie PKC łagodzi defekty przewodzenia i skurcze serca stwierdzone w tym modelu myszy. Inhibitor zmniejszył również błędną regulację zdarzeń splicingu regulowanych przez CUGBP1, ale nie regulowanych przez MBNL1, co sugeruje różne role tych białek w patogenezie sercowej DM1. Inhibitor PKC nie zmniejszał śmiertelności u myszy transgenicznych o podwyższonej regulacji serum CUGBP1, co wskazuje, że hamowanie PKC nie miało ogólnego działania ochronnego na wzrost CUGBP1 niezależny od PKC. Nasze wyniki sugerują, że farmakologiczna blokada aktywności PKC łagodzi fenotyp sercowy DM1 i dostarcza mocnych dowodów na rolę szlaku PKC w patogenezie DM1. Wprowadzenie Dystrofia miotoniczna (DM) jest najczęstszą postacią dystrofii mięśniowej występującej u dorosłych i drugą najczęściej spotykaną postacią dystrofii mięśniowej (1). DM jest dziedziczony dominująco i wpływa na wiele narządów, w tym na mięśnie szkieletowe, serce, mózg i układ hormonalny (2). W bardziej powszechnej postaci DM, DM (DM1), zaangażowanie serca występuje u 80% pacjentów (3, 4). Objawy DM1 są heterogenne i obejmują defekty przewodzenia, arytmię i kardiomiopatię rozstrzeniową (5). Ze względu na złożoność choroby serca, strategie leczenia są ograniczone. Ponadto zdarzenia molekularne związane z patogenezą serca DM1 są nieznane. Podstawą genetyczną DM1 jest ekspansja powtórzeń CTG w 3. nieulegający translacji region genu kinazy mioglobinowej dystrophica (DMPK) (2). Jądrowa akumulacja RNA DMPK z ekspandowanymi powtórzeniami CUG wyzwala zdarzenia, które prowadzą do zaburzeń rozwojowo regulowanego alternatywnego składania (6), co skutkuje niektórymi objawami choroby, takimi jak miotonia i insulinooporność (7. 9). Co najmniej 2 rodziny białek wiążących RNA wiążą się z patogenezą DM1: białkami CUGBP i podobnymi do ETR3 (CELF) i mięśniami podobnymi do mięśni (MBNL). Utrata funkcji MBNL i podwyższony poziom białka CELF, białka wiążącego CUG (CUGBP1), korelują z co najmniej niektórymi zmianami splicingu i objawami choroby obserwowanymi u pacjentów z DM1 (9. 11). Rozszerzony CUG powtarza białka wiążące i sekwestrujące MBNL, powodując ich utratę funkcji (12. 15). Na poparcie roli MBNL1 w patogenezie DM1, delecja izoform MBNL1, które wiążą się z ekspandowanymi powtórzeniami CUG u myszy prowadzi do zaćmy, miotonii, zmian specyficznych dla rozwoju, zmian histologicznych w mięśniu szkieletowym (10). Ponadto przywrócenie ekspresji MBNL1 przez dostarczanie genów wirusowych związanych z adenowirusem w mięśniu szkieletowym myszy eksprymujących RNA zawierający 250 powtórzeń CUG odwraca zmiany splicingowe i miotonię (16). Podczas gdy rola MBNL1 w patologii mięśni szkieletowych DM1 jest oczywista, należy scharakteryzować udział w patogenezie serca DM1. Oprócz sekwestracji MBNL1, rozszerzone powtórzenia CUG aktywują ścieżkę sygnalizacyjną PKC, prowadząc do hiperfosforylacji i stabilizacji białka CUGBP1 (17), zgodnej z podwyższonymi poziomami CUGBP1 w stanie równowagi w tkankach mięśnia sercowego i mięśni szkieletowych DM1 (9, 18). Nadekspresja CUGBP1 w sercu mysim i mięśniach szkieletowych prowadzi do zmian w składaniu DM1 i powoduje śmiertelność embrionów (19, 20), co silnie sugeruje patologiczne działanie w mięśniach poprzecznie prążkowanych. Jednakże, rola CUGBP1 w patogenezie sercowej DM1 nie została jeszcze zbadana. Utworzyliśmy wcześniej indukowalny model myszy DM1, w którym transgen zawierający ostatni ekson DMPK z powtórzeniami 960 CTG (EpA960) jest indukowany do ekspresji RNA zawierającego powtórzenie CUG [EpA960 (R)] po rekombinacji przez mediowane przez Cre usuwanie konkatameryzowane miejsca poliadenylacji (21). Wywołany indoksycyną i specyficzny dla serca ekspresja EpA960 (R) RNA została uzyskana z potomnego myszy transgenicznych EpA960 połączonych ze zwierzęciem MerCreMer (MCM), które eksprymują indukowalną formę Cre tamoksyfenu w sposób specyficzny dla serca (22).
[więcej w: turnusy rehabilitacyjne krynica zdrój, sennik koleżanka z pracy, moczówka prosta u psa ]
[więcej w: flucontrol max, bioxetin opinie, siódmy syn chomikuj ]