Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad 6

Brązowe zabarwienie naskórka i mieszków włosowych reprezentuje ekspresję AZ. Barwienie immunohistochemiczne dla PCNA w naskórku i zmianach podobnych do BCC w napromieniowanym PtB1 + /. UVB /. myszy z nadekspresją AZ. Ciemnobrązowe zabarwienie w podstawowej warstwie komórek naskórka i na wyspach nowotworowych reprezentuje ekspresję PCNA. Wpływ napromieniowania UVB na ekspresję AZ. U myszy Ptch1 + /. / AZ TgN, promotor K6 kieruje konstytutywną ekspresję AZ w ORS mieszka włosowego. Ponadto wiadomo, że promotory nowotworowe i inne bodźce proliferacyjne zwiększają ekspresję genów kierowaną przez K6 w ORS i indukują ich ekspresję w naskórku międzyfolikularnym (38). Badania lokalizacji immunohistochemicznych z zastosowaniem specyficznych przeciwciał skierowanych przeciwko AZ wykazują pozytywne wybarwienie w mieszków włosowych i pewne zabarwienie w naskórku myszy Ptch1 + /. / AZ TgN i Ptch1 + / + / AZ TgN traktowanych UVB, ale prawie nie wykazują barwienia w Ptch1 + /. i Ptch1 + / + zwierzęta, jak pokazano na Figurze 4D. Ekspresja PCNA w skórze napromieniowanej UVB w myszach Ptch1 + / A / AZ TgN. Barwienie immunohistochemiczne dla PCNA zastosowano do wykrywania proliferujących komórek w Ptch1 + / A / AZ TgN i Ptc1 + / p. myszy. Jądra PCNA-dodatnie były widoczne w nadobłonowych warstwach naskórka naświetlanej promieniowaniem UVB skóry Ptch1 + /. myszy, ale były praktycznie nieobecne w skórze zwierząt Ptch1 + /. / AZ TgN. Co ciekawe, mikroskopijne BCC u myszy Ptch1 + / A / AZ również wykazywały zmniejszone barwienie immunologiczne dla PCNA (Figura 4E). Badania nad napromieniowanym UVB Ptch1 + /. heterozygotyczne myszy leczone DFMO Aby dalej udokumentować wpływ hamowania aktywności ODC na wzrost BCC wywołanych UVB, zastosowaliśmy DFMO, samobójczy inhibitor ODC. Wykazano, że doustne podawanie DFMO hamuje rozwój wielu typów nowotworów w różnych mysich modelach nowotworów (39, 40), w tym wywołane UVB SCC w skórze bezwłosych myszy SKH-1 (35, 41. 44). Wpływ doustnego podawania DFMO na wywołany UVB rozwój BCC w Ptch1 + /. myszy. Jak pokazano na Fig. 5, A i B, leczenie DFMO zmniejszyło całkowitą liczbę widocznych nowotworów o około 30%. Jednakże liczba BCC i SCC u zwierząt traktowanych DFMO została zmniejszona do około 60% w grupie kontrolnej, której podawano nośnik, podczas gdy nie było żadnego wpływu na liczbę włókniakomięsaków (Figura 5C). Te liczby nowotworów stanowią sumę zarówno istniejących guzów na początku eksperymentu, jak i nowych guzów, które rozwinęły się podczas 20 tygodni leczenia DFMO. Nie było możliwe ustalenie, czy leczenie DFMO preferencyjnie wyłączyło istniejące guzy lub czy zmniejszyło liczbę nowych nowotworów, czy też oba. Jak pokazano na rycinie 5, D i E, leczenie DFMO nie tylko zmniejszyło widoczne guzy, ale także zmniejszyło mikroskopowe uszkodzenia podobne do BCC o ponad 80%. Figura 5 Wpływ DFMO na indukowaną przez UVB nowotworzenie skóry w Ptch1 + / P myszy. (A) Wpływ podawania DFMO na wzrost wywoływanych przez UVB guzów skóry. Eksperyment zakończono w 52. tygodniu. (B) Myszy wykazujące wpływ traktowania DFMO na wywołane UVB nowotwory skóry. Po lewej: kontrola traktowana UVB. Po prawej: mysz leczona UVB i DFMO, pokazana w 52. tygodniu. (C) Wpływ doustnie podawanego DFMO na wzrost BCC indukowanych UVB, SCC i włókniakomięsaka. * P <0,025. ** P <0,05. Barwienie (D) a-Gal (niebieskie) i H & E (czerwone) pokazujące wpływ doustnie podawanego DFMO na wywołane UVB mikroskopowe zmiany typu BCC w Ptch1 + / y. myszy. Górny panel: fragment skóry z naświetlonego UVB Ptch1 + /. mysz. Panel dolny: fragment skóry z napromieniowanego UVB Ptch1 + /. Naświetlanego DFMO. mysz. (E) Wpływ doustnego podawania DFMO na wywołane UVB mikroskopowe zmiany typu BCC w Ptch1 + / A myszy. Próbki pełnej grubości skóry grzbietowej utrwalono w 10% zbuforowanej formalinie i wybarwiono H & E i P-gal, a mikroskopijne zmiany podobne do BCC zmierzono jako całkowitą powierzchnię guza na próbkę skóry o milimetrze kwadratowym. Wpływ DFMO na ekspresję genów szlaku SHH. Wpływ traktowania DFMO na ekspresję genów szlaku SHH w nienaszczepionej promieniowaniem UVB skórze Ptch1 + /. określono również myszy. Obróbka DFMO zmniejszała ekspresję mRNA genów szlaku SHH Ptch1, Ptch2, Gli1, Gli2 i Gli3 (dane nie pokazane). Wpływ DFMO na ekspresję białek regulatorowych cyklu komórkowego. W piątym tygodniu leczenia DFMO nastąpił znaczny spadek indukowanej UVB nadekspresji białek cyklu komórkowego, które regulują proliferację, takich jak cykliny A2, B1 i D1 (Figura 6, A i B) [podobne: usg stawów biodrowych u niemowląt kraków, moczówka prosta u psa, przychodnia góra kalwaria ] [podobne: sinulan ulotka, jak oduczyć psa skakania, flucontrol max ]