Dekarboksylaza ornityny jest celem chemoprewencji raków podstawnokomórkowych i płaskonabłonkowych w Ptch1 + / myszy ad 5

Te keratyny były obficie eksprymowane w nadnasadkowym naskórku niezaszczepionej skóry, ale w tych BCC zaobserwowano bardzo małe lub żadne zabarwienie (dane nie pokazane). Zgodnie z wzorem widocznym w ludzkich BCC, ekspresję K6 obserwowano we wszystkich warstwach naskórka i w BCC. Ekspresja K6 jest charakterystyczna dla hiperproliferacji i jest cechą komórek nowotworowych w BCC i naskórku pokrywającym tkankę nowotworową (dane nie pokazane). Badania w Ptch1 + /. myszy heterozygotyczne z nadekspresją AZ Aby dodatkowo wykazać znaczenie indukcji ODC w rozwoju BCC, użyliśmy myszy transgenicznych o ukierunkowanej ekspresji AZ w celu hamowania aktywności ODC i tłumienia poziomów poliamin w skórze naszego Ptch1 + /. myszy, a następnie przeprowadzono badania w celu oceny ich podatności na fotokarcinogenezę wywołaną przez UVB. Ptch1 + /. myszy heterozygotyczne z nadekspresją AZ. W tych doświadczeniach uzyskaliśmy podobną liczbę myszy Ptch1 + / A / AZ TgN, Ptch1 + / a, Ptch1 + / + i Ptch1 + / + / AZ. Ptch1 + /. myszy heterozygotyczne z nadekspresją AZ (myszy Ptch1 + / A / AZ TgN) mają fenotyp rażąco normalny. Indukowane UVB BCC u myszy Ptch1 + / A / AZ TgN. Wpływ przewlekłego promieniowania UVB na myszy Ptch1 + / A / AZ TgN, Ptch1 + / a, Ptch1 + / + / AZ TgN i Ptch1 + / + (typu dzikiego) pokazano na Figurze 3A. Zwierzęta te rozwinęły wiele widocznych nowotworów (Figura 3B). Histologicznie, guzy te były niejednorodne i obejmowały BCC, SCC, brodawczaki i włókniakomięsaki, jak pokazano w Tabeli 2. Myszy TchN z Ptch1 + / A / AZ rozwinęły znacznie mniej widocznych BCC (P <0,04) w porównaniu z ich Ptch1 + / A. z miotu (Tabela 2), a objętość tych guzów również była znacznie zmniejszona (P <0,008), jak pokazano na Figurze 3C. Podobnie powierzchnia guza (0,234 x 10 3 <0,16 x 10 3 mm2 w porównaniu z 4,059 x 10 3 . 1,7 x 10 3 mm2 na jednostkę powierzchni sekcji) i liczba (0,18. 0,04 / mm2 powierzchni tkanki w porównaniu z 0,06. 0,02 / mm2 powierzchni tkanki) mikroskopijnych BCC były również znacząco zmniejszone (P <0,04) u myszy Ptch1 + / A / AZ TgN w porównaniu z Ptch1 + / p myszy, jak pokazano odpowiednio na Figurach 3, D i E. Histologia i względna wielkość mikroskopijnych BCC w Ptch1 + /. i myszy Ptch1 + / A / AZ TgN pokazano na Figurze 3F. U myszy Ptch1 + / + / AZ TgN nie rozwinęły się SCC ani włókniakomięsaki i tylko kilka brodawczaków, podczas gdy ich mioty z rodziny Ptch1 + / + rozwinęły głównie SCC i włókniakomięsaki (Tabela 2). Myszy Ptch1 + / A / AZ TgN również wykazywały jedynie brodawczaki. Jednakże, podobnie jak myszy Ptch1 + / +, Ptch1 + /. u myszy rozwinęły się SCC i włókniakomięsaki (Tabela 2). Figura 3 Wpływ nadekspresji AZ na rozwój nowotworów wywoływanych przez UVB w skórze dzikiego typu i Ptch1 + /. myszy. (A) Wpływ nadekspresji AZ na liczbę nowotworów wywołanych UVB. (B) Dziki typ i Ptch1 + /. myszy normalnie i z nadekspresją AZ, chronicznie wystawione na działanie UVB. (C) Objętość wywołanych UVB makroskopowych guzów. * P <0,008 vs. Ptch1 + / .. ** P <0,05 w stosunku do Ptch1 + / +. (D) Wpływ nadekspresji AZ na obszar wywołanych przez UVB mikroskopowych zmian podobnych do BCC. (E) Wpływ nadekspresji AZ na liczbę zmian mikroskopowych typu BCC indukowanych UVB. (F) Histologia skóry wykazująca zabarwienie dla. -Gal (niebieski) w zmianach podobnych do BCC. Tabela 2 Wpływ ekspresji AZ na guza indukowane UVB w Ptch1 + / A i myszy typu dzikiego (Ptch1 + / +) Efekty naświetlania UVB na skórnym ODC i poliaminach. Wpływ UVB na indukcję ODC w skórze myszy Ptch1 + / A / AZ TgN, Ptch1 + / a, Ptch1 + / + i Ptch1 + / + / AZ TgN porównano na Figurze 4. Analiza Western blot wykazała niższe poziomy ODC w Ptch1 + Myszy /. / AZ TgN niż w Ptch1 + /. myszy. Podobnie, ODC było zmniejszone u myszy Ptch1 + / + / AZ w porównaniu ze zwierzętami Ptch1 + / + (Figura 4A). Równolegle, indukcja UVB aktywności ODC była znacząco niższa u myszy Ptch1 + / A / AZ TgN niż w Ptch1 + / p. myszy (P <0,05). Podobnie, indukcja ODC była znacznie niższa u myszy Ptch1 + / + / AZ niż u ich myszy z miotem Ptch1 + / + (P <0,013), jak pokazano na Figurze 4B. Następnie oceniliśmy wpływ nadekspresji AZ na indukowaną UVB syntezę poliaminy podczas nowotworzenia BCC. Nadekspresja AZ zarówno w napromieniowanym UVB Ptch1 + /. a myszy Ptch1 + / + znacząco zmniejszyły poziomy putrescyny (Figura 4C). Spermidyna i spermina są dodatkowymi poliaminami wytworzonymi z putrescyny przez kolejne działanie syntazy spermidyny i syntazy sperminy, która katalizuje przeniesienie grupy aminopropylowej z dekarboksylowanej S-adenozylometioniny wytwarzanej przez enzym dekarboksylazę S-adenozylometioniny (28, 37). Poziom tych poliamin nie uległ zmianie (dane nie pokazane). Figura 4 Wpływ nadekspresji AZ na poziomy i aktywność ODC w skórze napromienionego UVB typu dzikiego i Ptch1 + /. myszy. (A) Analiza Western blot pokazująca wpływ nadekspresji AZ na ODC [patrz też: najsmieszniejsze nazwiska, jaka sukienka na studniówkę, rozpiska ćwiczeń na siłowni ] [więcej w: trosicam 15 mg, najsmieszniejsze nazwiska, pro kolin ]