Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie błony naczyniowej (EAU) jest chorobą siatkówki nerwowej indukowaną przez immunizację antygenami siatkówki, taką jak interpenoreceptorowe białko wiążące retinoid (IRBP) i arestynę (rozpuszczalny antygen siatkówki, S-Ag). EAU służy jako model dla ludzkich autoimmunologicznych chorób naczyniowo-moczowych związanych z genami głównego kompleksu zgodności tkankowej (HLA), w których pacjenci wykazują odpowiedzi immunologiczne na antygeny siatkówki. Poniżej przedstawiamy rozwój humanizowanego modelu EAU w myszach transgenicznych (TG) HLA. Myszy HLA-DR3, -DR4, -DQ6 i -DQ8 TG były wrażliwe na EAU indukowaną IRBP. Co ważne, myszy HLA-DR3 TG rozwinęły ciężką EAU z S-Ag, do której myszy typu dzikiego są wysoce oporne. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II”

Nietoperze z chorobą WNS

ZnalezioneGrzyby kolonizują odsłonięte powierzchnie skóry zimujących nietoperzy, zwłaszcza skrzydeł, powodując zmiany w naskórku, gdzie przenikają do skóry właściwej (Cryan i wsp., 2010, Meteyer i wsp., 2012, Warnecke i wsp., 2013). Inwazja ta prowadzi do zaburzeń homeostatycznych, które mogą rozpocząć się w stanie hibernacji (Verant i in., 2014), ale które stają się najbardziej widoczne w późnej hibernacji (Warnecke i wsp., 2013, McGuire i in., 2016, 2017). Najbardziej klasycznym objawem WNS jest charakterystyczny wzrost częstotliwości okresowego pobudzenia w hibernacji (Reeder i wsp., 2012, Warnecke i wsp., 2012, 2013, Verant i wsp., 2014, McGuire i in., 2017). Zainfekowane nietoperze wykazują również wyższy wskaźnik metabolizmu (TMR) niż zdrowe nietoperze (McGuire i wsp., 2017). Częste pobudzenia i większe wyczerpywanie TMR ogranicza gromadzenie się zapasów tkanki tłuszczowej, co prawdopodobnie prowadzi do śmierci z powodu głodu (Warnecke i wsp., 2013, Verant i wsp., 2014).

Utrata płynu przez uszkodzoną skórę jest jednym z możliwych czynników zwiększających częstotliwość pobudzenia podczas WNS (Willis i wsp., 2011). Nietoperze z WNS cierpią na wyższą utratę wody wyparnej (EWL) w porównaniu ze zdrowymi nietoperzami (McGuire i wsp., 2017), a także wykazują obniżenie stężenia elektrolitów we krwi, w szczególności sodu i chlorków (Cryan i wsp., 2013, Warnecke et al. , 2013, McGuire i wsp., 2016). Odwodnione nietoperze mogą pić wodę dostępną w hibernacula podczas okresowego pobudzenia, ale te źródła wody nie zawierają znaczących stężeń elektrolitów lub innych składników odżywczych (Vanderwolf i wsp., 2017). W związku z tym, gdy nietoperze tracą płyny ustrojowe zawierające wodę i elektrolity ze zmian naskórka, mogą zastąpić utraconą wodę przez picie, ale nie mogą zastąpić elektrolitów, co prowadzi do stanu hipotonicznego odwodnienia (Warnecke i wsp., 2013; Verant i wsp., 2014 ).
[hasła pokrewne: sinulan ulotka, jak oduczyć psa skakania, flucontrol max ]

Grzybotwórcze patogeny przyczyną nowych chorób zakaźnych u dzikich zwierząt

ZnalezioneGrzybotwórcze patogeny są coraz częściej uznawane za przyczynę nowych chorób zakaźnych u dzikich zwierząt, powodując gwałtowny spadek populacji i utratę różnorodności biologicznej na całym świecie (Fisher et al., 2012). Dwa najbardziej znaczące przykłady to Batrachochytrium dendrobatidis, który powoduje chytridiomycosis i doprowadził do zmniejszenia populacji płazów na całym świecie (Berger i wsp., 2016) oraz Pseudogymnoascus destructans, który powoduje zespół białego nosa (WNS) i zabił miliony hibernujących nietoperzy w Ameryce Północnej w ciągu ostatniej dekady. Zmiany w względnej obfitości nietoperzy w krajobrazie zaobserwowano wkrótce po odkryciu WNS (Dzal i wsp., 2011), a modele populacji oparte na liczebności nietoperzy w hibernaculi podkreślały dramatyczny spadek populacji dotkniętych chorobą (Frick et al., 2010, 2017). Po ponad dziesięciu latach od pierwszego zaobserwowania WNS (Blehert i wsp., 2009), coraz lepiej rozumie się przyczyny i patofizjologię choroby (Lorch i wsp., 2011, Warnecke i wsp., 2012, 2013; , 2015, Frick i wsp., 2016, McGuire i wsp., 2017, Mayberry i wsp., 2018).
[patrz też: trosicam 15 mg, najsmieszniejsze nazwiska, pro kolin ]

Zespół białego nosa u nietoperzy

ZnalezioneGrzyby są coraz częściej uznawane za szkodliwe patogeny dzikiej zwierzyny. Zespół białego nosa (WNS) jest chorobą grzybiczną, która zabiła miliony hibernujących nietoperzy w Ameryce Północnej. Wysoka śmiertelność doprowadziła do badań w celu zidentyfikowania strategii zarządzania chorobą. Zwiększony wydatek energetyczny i ubytek tkanki tłuszczowej, a także utrata płynów, odwodnienie hipotoniczne i wyczerpanie elektrolitów wydają się być kluczowymi aspektami patofizjologii WNS. Nietoperze z WNS zbyt szybko zużywają energię, a także tracą płyny zawierające wodę i elektrolity ze zmian na odsłoniętych powierzchniach skóry. Podczas okresowego pobudzenia nietoperze często piją wodę, ale w większości obszarów dotkniętych przez WNS żywność nie jest dostępna zimą, a zatem nie mogą utrzymać równowagi energetycznej ani zastąpić utraconych elektrolitów. Dlatego dostarczenie płynnego suplementu kalorii / elektrolitu / odżywki może być użyteczne w leczeniu WNS. Przebadaliśmy niewidome, hibernujące małe brązowe nietoperze (Myotis lucifugus) w celu sprawdzenia, czy dostarczenie dodatkowej energii i elektrolitów (rozcieńczenie 1: 1 nieopalonego Pedialyte) do hibernujących nietoperzy może zmniejszyć nasilenie objawów WNS i zwiększyć przeżycie. Zakażone nietoperze w grupie z suplementem Pedialyte zasadniczo unikały Pedialyte i preferowały wypijanie czystej wody. Nie zaobserwowaliśmy żadnych różnic w przeżyciu, częstotliwości podniecenia lub chemii krwi, ale nietoperze w grupie z suplementem Pedialyte miały wyższe ładunki grzybowe i więcej fluorescencji UV niż grupa kontrolna, która była tylko zaopatrzona w wodę. Uzupełniające elektrolity byłyby atrakcyjną strategią zarządzania ze względu na niski koszt i logistyczną wykonalność, ale nasze wyniki sugerują, że takie podejście byłoby nieskuteczne. Jednak może być przydatne prowadzenie eksperymentów preferencji z wielokrotnymi rozcieńczeniami i / lub smakami roztworu elektrolitu. Chociaż nie preferowano Pedialyte w eksperymencie, nietoperze z dłoni łatwo go piją, a suplementacja elektrolitem pozostaje ważnym narzędziem do rehabilitacji nietoperzy wychodzących z WNS i innych przyczyn odwodnienia.
[więcej w: otifree, mały weterynarz, isonasin ]

Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 6

Działanie cytotoksyczne przeciwciał zostało wykluczone, ponieważ przeciwciała anty-HLA nie wpływały na proliferację limfocytów typu dzikiego na antygen, a ponieważ liczba komórek w tle w obecności przeciwciał bez antygenu nie różniła się od tła w obecności samej pożywki (dane nie pokazane ). Figura 4 Odpowiedź proliferacyjna komórek węzłów chłonnych na bS-Ag. Pokazano średnią wskaźników stymulacji obserwowanych w kilku eksperymentach. Paski błędów wskazują SE. Istotna różnica w porównaniu z kontrolą (P. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 6”

Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 5

Bardzo ciężka choroba u myszy DR3 TG immunizowanych S-Ag. Zwróć uwagę na całkowite zniszczenie warstw komórek fotoreceptorów, w tym komórek fotoreceptorów (H & E, x 200). Figura 2 Wrażliwość myszy HLA TG na indukowaną IRBP EAU. Bary są średnią ocen chorobowych. Częstość występowania choroby (dodatnia wśród wszystkich myszy) znajduje się obok każdego paska. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad 5”

Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4

Wyniki przedstawiono jako wskaźniki stymulacji, obliczone jako średnie cpm hodowlanych w trzech powtórzeniach z antygenem, podzielone przez średnią cpm hodowli w trzech powtórzeniach z pożywką,. SE. Element restrykcyjny zaangażowany w prezentację antygenu oceniano za pomocą testów blokowania przeciwciał przy użyciu oczyszczonych przeciwciał przeciwko DR (klon L243), DQ (klon Tü 39 lub Tü 169), IA (klon AF6-120.1) lub IE (klon 14-4-4S ) (BD Pharmingen). Przeciwciała dodano w stężeniu 10 .g / ml do dołków zawierających komórki w obecności lub pod nieobecność odpowiedniego stymulującego antygenu. Hodowle inkubowano przez 60 godzin i pulsowano 3H tymidyną (1,0 Ci / 10 ul / studzienkę) przez ostatnie 18 godzin. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II czesc 4”

Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II cd

S-Ag oczyszczono metodą Buczylko i Palczewskiego (27) z modyfikacjami opisanymi przez Puig i in. (28). Końcową elucję z kolumny z heparyną-agarozą przeprowadzono przez gradient od 10 mM HEPES i 15 mM NaCl, pH 7,0, do 10 mM HEPES i 400 mM NaCl, pH 7,0. Oczyszczone bS-Ag połączono w pulę w oparciu o OD 278 nm. Przygotowanie rekombinowanej ludzkiej S-Ag (hS-Ag) opisano wcześniej (29). Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II cd”

Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad

W obrębie każdego gatunku widoczna jest zależna od szczepu podatność, która co najmniej częściowo wynika z kontroli MHC. Podatne haplotypy H2 to H2b, H2d, H2k i H2r. Kontrola podatności MHC na EAU w haplotypie H2k została wstępnie zmapowana do podregionu IA (homolog ludzkiego HLA-DQ), z efektami modyfikującymi z locus IE (homologiczny z ludzkim HLA-DR) (15). Aby lepiej zbadać rolę cząsteczek HLA w patogenezie zapalenia błony naczyniowej, podjęliśmy się opracowania. Humanizowanego. Read more „Humanizowany model doświadczalnego autoimmunologicznego zapalenia błony naczyniowej oka u myszy transgenicznych HLA klasy II ad”

Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd

Dodano streptawidynę sprzężoną z HRP (DAKO Corp., Carpinteria, California, USA) i inkubowano przez 30 minut, a następnie szkiełka przemyto PBS / 0,05% Tween-20. Na końcu dodano substrat peroksydazy diaminobenzydynę (Vector Laboratories Inc., Burlingame, California, USA) i inkubowano przez 15 minut. Szkiełka zostały przepłukane i wybarwione kontrastowo hematoksyliną Mayera. Dodano roztwór montażowy i szkiełka nakrywkowe. Wyizolowane komórki zrębu-naczyniowego zaszczepiano w szkiełkach komorowych (Nalge Nunc International, Naperville, Illinois, USA) w stężeniu 5 x 105 na komorę w DMEM zawierającym 20% FCS (HyClone Laboratories, Logan, Utah, USA) i 20 ng / ml rekombinowanej myszy G-CSF (R & D Systems Inc., Minneapolis, Minnesota, USA) do hodowli całonocnej. Read more „Przewlekłe zapalenie tłuszczu odgrywa kluczową rolę w rozwoju oporności na insulinę związanej z otyłością cd”